产品介绍：
该试剂盒基于TaqMan荧光探针法实时荧光PCR技术，通过特异性引物和探针靶向ASFV的保守基因序列，用于非洲猪瘟的早期快速诊断、鉴别诊断及流行病学调查。鉴于非洲猪瘟的高致死率和对养猪业的毁灭性打击，该试剂盒是目前防控疫情最核心的检测手段之一。
产品名称 | 非洲猪瘟(ASFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3664 |
检测原理与技术
该试剂盒采用探针法荧光PCR技术，针对非洲猪瘟病毒特有的DNA序列进行扩增和检测。
靶标基因： 针对ASFV的P72基因（B646L）、P54基因或VP73基因等高度保守区域设计特异性引物和探针。其中P72基因是目前最常用的靶标，覆盖所有基因型。
技术原理：
DNA扩增： 由于ASFV是双链DNA病毒，试剂盒直接采用荧光PCR法（不需要逆转录步骤）。
信号检测： 在PCR扩增过程中，特异性探针（通常标记为FAM荧光素）与目标DNA序列结合并被酶切，释放出荧光信号。仪器实时监测荧光信号的变化，从而判断样本中是否存在ASFV核酸。
多重检测系统： 许多高端试剂盒采用双重或多重荧光检测：
FAM通道： 检测ASFV特异性基因。
HEX/VIC通道： 检测猪源内参基因（如β-actin或RNase P），用于监控样本采集质量及是否存在PCR抑制物。
�� 核心性能指标
指标 参数 说明
检测样本 抗凝血（EDTA）、血清、脾脏、淋巴结、扁桃体、环境样本（猪圈/车辆） 适用于临床及环境监测
检测下限 1×10³ copies/mL 或 50% 豚鼠感染量 (HAD₅₀) 灵敏度极高，可检出潜伏期病毒
特异性 100% 不与猪瘟病毒、蓝耳病病毒等其他猪病原体交叉反应
检测时间 约1.5 - 2小时 含DNA提取及PCR扩增步骤
保存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存，避免反复冻融
�� 典型操作流程
样本采集：
活猪： 采集抗凝全血（EDTA抗凝管）或口腔液。
死猪： 采集脾脏、淋巴结、扁桃体等组织样本。
DNA提取： 使用试剂盒配套的病毒DNA提取试剂（磁珠法或离心柱法）提取样本中的总DNA。
反应体系配制： 将提取的DNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。
上机扩增： 放入荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Roche LightCycler等）中运行程序。典型的程序包括预变性（95℃ 3-5分钟）及40-45个循环的PCR扩增（95℃变性，60℃退火/延伸并收集荧光）。
结果判读：
阳性： FAM通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值 ≤ 35-40（视具体说明书而定），表明样本中存在ASFV DNA。
可疑： Ct值在35-40之间，建议重复检测，若仍有扩增则判为阳性。
阴性： FAM通道无扩增曲线，或Ct值 > 40。
�� 临床与应用意义
早期预警： 在猪群出现临床症状（高热、皮肤发绀）前即可检测出病毒血症，实现“早快严小”的防控原则。
拔牙清除： 用于精准识别感染猪只，配合“拔牙式”扑杀，保护大群安全。
环境监测： 用于猪场、运输车辆、屠宰场的环境采样检测，评估生物安全风险。
鉴别诊断： 用于区分非洲猪瘟与其他引起高热和出血性病变的猪病（如经典猪瘟、败血型猪丹毒等）。
⚠️ 注意事项
生物安全： 非洲猪瘟病毒危害严重，所有操作必须在生物安全二级（BSL-2）或以上的实验室进行，穿戴全套防护装备。
防污染： PCR实验室必须严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），使用带滤芯吸头，防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读： 阳性结果表明存在ASFV感染，必须立即上报当地兽医主管部门，并启动应急预案。阴性结果不能完全排除感染（如处于潜伏期或采样不当），需结合临床症状复核。
PCR试剂盒的核心类型：
1. 常规PCR试剂盒
原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。
特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。
典型应用：动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒
探针法（TaqMan）：
利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。
优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。
染料法（SYBR Green）：
染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。
公司正在出售的产品：
白介素1受体1抗体 | CYP1B1 细胞色素cP4501B1抗体 |
磷酸化白介素-1受体相关激酶4抗体 | 小核核糖核蛋白E抗体 |
ZC3H7A ZC3H7A蛋白抗体 | ITM2B 跨膜蛋白BRI抗体 |
羟辅酶A脱氢酶β抗体 | PVDF膜0.22μm 12cm×20cm/张 |
APAF1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗体（N端） | 人雌激素硫酸转移酶(SULT1E1)核酸检测试剂盒 |
CDK2, Alexa Fluor 680 conjugated AF680标记的周期素依赖性激酶2抗体 | 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)PCR检测试剂盒 |
PRKR相互作用蛋白1抗体 | 小鼠封闭蛋白2(CLDN2)PCR检测试剂盒 |
ATG1/ULK1 自噬相关蛋白1抗体 | 大鼠封闭蛋白5(CLDN5)PCR检测试剂盒 |
髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白抗体 | 豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)PCR检测试剂盒 |
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HRASLS5蛋白抗体 | 小鼠胃泌素(GT)PCR检测试剂盒 |
Pancreatic hormone 胰腺激素抗体 | 大鼠α-乳清蛋白(αLA)PCR检测试剂盒 |
EB病毒LMP-2A蛋白抗体 | 人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)核酸检测试剂盒 |
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)PCR检测试剂盒 | 非洲猪瘟(ASFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)谷草转氨酶GOT/AST测试盒IFCC推荐方法 150ml 紫外比色法 |
大鼠可溶性CD30配体(sCD30L)PCR检测试剂盒免费代测 | 小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)核酸检测试剂盒 |
人Klotho 核酸检测试剂盒 | 鱼磷酸烯醇丙酮酸羧激酶,线粒体(PCK2)核酸检测试剂盒 |
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