产品介绍:
这类试剂盒是目前ASFV检测的主流产品,因其高灵敏度、高特异性和带有内参监控系统而被广泛应用于各级实验室。
产品名称 | 非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测试剂盒(带内参,PCR-荧光探针法) | 货号 | AP3599 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 48T |
�� 检测原理
该试剂盒基于双重荧光定量PCR(qPCR)技术,采用TaqMan探针法。
双通道检测:
FAM通道(检测通道):针对非洲猪瘟病毒(ASFV)的高度保守基因(如P72基因或MGF基因)设计特异性引物和探针。如果样本中含有ASFV DNA,该通道会检测到荧光信号的指数级增长。
HEX/VIC通道(内参通道):针对猪的内源性基因(如β-actin或18S rRNA)设计引物和探针。该通道用于监控样本采集质量、核酸提取效率以及反应体系是否正常,防止因样本抑制或操作失误导致的假阴性结果。
✅ 主要优势
高灵敏度与特异性:能够检测出极低拷贝数的病毒DNA(部分产品检测限可达5-10³ copies/mL),且能特异性识别ASFV,与其他猪源病原体无交叉反应。
结果可靠(带内参):内置内参系统是此类试剂盒的核心优势。如果内参检测失败(无扩增曲线),说明样本采集不当、核酸降解或存在PCR抑制物,该样本需重新采样或处理,从而有效避免了“假阴性”漏检。
快速高效:整个检测流程(含核酸提取)通常在2-3小时内完成,远快于传统的病毒分离培养。
操作便捷:市面上多数产品采用预混液形式(2×Master Mix),只需加入模板即可上机,降低了操作误差。
�� 典型产品参数
项目 参数/规格
检测方法 实时荧光定量PCR(探针法)
包装规格 48T / 48T / 盒
保存条件 -20℃避光保存,避免反复冻融
检测仪器 ABI 7500、Roche LightCycler、Bio-Rad CFX96等
检测样本 猪全血(EDTA抗凝)、脾脏、淋巴结、肾脏组织、环境拭子等
�� 结果判读标准
检测结果需同时满足质控标准和样本判定标准。
1. 质控标准(实验有效性)
阳性对照:FAM通道应出现典型的S型扩增曲线,且Ct值通常 ≤ 30-35(具体视说明书而定)。
阴性对照:FAM通道无扩增曲线或Ct值 ≥ 40。
内参(内源性对照):所有样本(包括阴阳性对照)的HEX/VIC通道均应出现扩增曲线且Ct值正常(通常在20-30之间),表明样本无抑制、提取成功。
2. 样本判定标准
阳性(+):FAM通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值 ≤ 35(或说明书规定的阈值)。
阴性(-):FAM通道无扩增曲线,或Ct值 ≥ 40。
可疑(±):Ct值在35-40之间,且有明显的指数增长趋势。建议对该样本进行复测,若复测结果仍在此区间或判定为阳性,则报告为阳性。
⚠️ 注意事项
样本采集:抗凝血首选EDTA抗凝,严禁使用肝素抗凝(肝素会抑制PCR反应)。组织样品需充分研磨。
防止污染:由于灵敏度极高,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区),使用带滤芯的吸头,防止气溶胶污染导致假阳性。
临床意义:该检测仅用于检测病毒核酸,阳性结果表明样本中存在ASFV核酸,需结合临床症状(如高热、皮肤发绀、死亡率异常升高等)和病理剖检进行综合判断。环境样品检测阳性需立即进行彻底消毒。
公司正在出售的产品:
甘氨酰胺核苷酸合成酶单克隆抗体 | CUTA 乙酰胆碱酯酶相关蛋白抗体 |
上皮特异性ETs转录因子抗体 | 智力发育调节相关蛋白BRWD3抗体 |
HGF beta 肝细胞生长因子β抗体 | GNL3L 鸟嘌呤核苷酸结合蛋白3样蛋白抗体 |
铜代谢结构域蛋白1抗体 | 大鼠5核苷酸酶(5-NT)PCR检测试剂盒 |
RNF8 环指蛋白8抗体 | 人泛素蛋白(Ub)核酸检测试剂盒 |
FP100 FP100蛋白抗体 | 大鼠硬骨素(SOST)PCR检测试剂盒 |
低密度脂蛋白受体相关蛋白10抗体 | 小鼠缓激肽(BK)PCR检测试剂盒 |
DULLARD DULLARD蛋白抗体 | 大鼠核转录因子κB (NFκB)PCR检测试剂盒 |
锌指蛋白782抗体 | 小鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)PCR检测试剂盒 |
phospho-inaD (Thr666) 磷酸化inaD蛋白抗体 | 人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)PCR检测试剂盒 |
X染色体开放阅读框34抗体 | 小鼠孕酮(PROG)PCR检测试剂盒 |
C9ORF43 9号染色体开放阅读框43抗体 | 大鼠吡啶交联物(PY)PCR检测试剂盒 |
LIM结构域蛋白1抗体 | 山羊白介素2(IL-2)PCR检测试剂盒 |
小鼠亲环素A(CYPA)PCR检测试剂盒 | 非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测试剂盒(带内参,PCR-荧光探针法)激动素(KT)含量试剂盒 |
大鼠前列腺素F受体(FP)PCR检测试剂盒 | 小鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)PCR检测试剂盒 |
人β-防御素1(DEFB1)PCR检测试剂盒 | 猪β干扰素(IFN-β)PCR检测试剂盒 |
PCR试剂盒的核心类型
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
关键字: 非洲猪瘟病毒 ;ASFV 带内参;核酸检测试剂盒;PCR-荧光探针法;
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