大鼠内皮祖细胞
产品信息:
产品名称 大鼠内皮祖细胞
组织来源 正常骨髓血组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rat primary endothelial progenitor cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 梭状,不规则细胞 | 货号 | P-X1687 |
细胞简介:
细胞详述
内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞 ,在生理或病理因素刺激下,可从骨髓动员到外周血参与损伤血管的修复研究显示,内皮祖细胞在心脑血管ji病、外周血管ji病、肿瘤血管形成及创伤yu合等方面均发挥重要作用,并为缺血性ji病的研究zhi疗提供了新思路。
内皮祖细胞具有游走特性,能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞,缺乏成熟内皮细胞的特征性表型,不能形成管腔样结构。其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常骨髓血组织。
2)细胞鉴定:CD31或CD34免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:梭状,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
我们推荐使用 Delf原代 内皮 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义:
大鼠内皮祖细胞是存在于大鼠骨髓、外周血及脐带血等组织中的一种内皮前体细胞,具有自我更新和分化为成熟内皮细胞的能力。它可参与胚胎期血管的发生和成年期血管的损伤修复,在缺血性疾病的血管再生、肿瘤血管生成及心血管疾病治疗研究中具有重要应用价值。
原代细胞分离:
组织取材
无菌操作是底线:取材前对动物/组织进行严格消毒,全程在超净台内操作,所有工具提前灭菌
新鲜度决定活性:取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中,30分钟内完成分离,若无法即时处理,可暂存于4℃冰箱(不超过24小时)
精准取材:避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织,比如分离肝细胞时要剔除胆囊,分离神经细胞时要去除脑膜
组织处理
机械法:通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织,适用于结缔组织较少的组织(如肝脏、肾脏),注意力度适中,避免过度研磨损伤细胞
酶解法:根据组织类型选择合适的酶:
胰蛋白酶:适用于消化上皮组织、肝、肾等,浓度0.25%-0.5%,消化时间15-30分钟,37℃
胶原酶:适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等,浓度0.1%-0.3%,消化时间1-4小时,37℃,可加入EDTA增强效果
透明质酸酶:常与胶原酶联用,消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织
联合法:机械剪碎后再进行酶解,兼顾效率与细胞活性
细胞筛选与纯化
过滤:使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织块
离心:800-1200RPM离心5-8分钟,弃上清后用PBS重洗2-3次,去除细胞碎片和酶液
特异性纯化:使用差速贴壁法(利用不同细胞贴壁速度差异)、密度梯度离心法(如Percoll、Ficoll)、免疫磁珠分选或流式细胞术,获得高纯度目标细胞
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实验后处理:
废弃样本处理:
细胞废弃物消毒:实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放,培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。
动物组织处理:剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋,由专业机构进行无害化处理,避免生物污染。
实验设备清洁:
超净工作台清洁:实验结束后用75%酒精擦拭台面,打开紫外灯照射30分钟,关闭风机。
培养箱定期清洁:每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板,每2周更换一次培养箱内的水盘,避免滋生细菌。
关键字: 大鼠内皮祖细胞;梭状,不规则细胞;贴壁;
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