重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
NPM1是一种主要的核仁磷酸化蛋白,属于核磷蛋白家族。其核心功能具有多样性,是维持细胞正常生理活动的关键分子:它作为分子伴侣参与核糖体RNA的加工与核糖体亚基的组装;调节细胞周期中的中心体复制;并作为p53肿瘤抑制通路的重要调控因子。在应激条件下,NPM1会发生核质转位,激活DNA损伤应答。值得注意的是,NPM1在多种癌症中异常表达或发生突变,尤其在急性髓系白血病(AML)中,其突变体(NPMc+)会导致蛋白错误定位并驱动癌变。最新研究还发现,NPM1能通过抑制抗原呈递机制帮助肿瘤细胞实现免疫逃逸。
产品名称; Recombinant Human Nucleophosmin
别名; B23, MGC104254, NO38, NPM, NPM_HUMAN, NPM1, Nucleolar phosphoprotein B23, Nucleolar protein NO38, Nucleophosmin, Nucleophosmin (nucleolar phosphoprotein B23 numatrin), nucleophosmin nucleoplasmin family member 1, Nucleophosmin/nucleoplasmin family member 1, Numatrin, OTTHUMP00000161024, OTTHUMP00000161025, OTTHUMP00000223397, OTTHUMP00000223398
宿主; E.Coli
表达区间; 1-294
分子量; 32.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
突触糖蛋白2 | 组织氯乙酰基转移酶(CAT)报告基因活性荧光薄层色谱(TLC)酶联免疫试剂盒 |
DNA交联修复基因SNM1 | 细胞ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达流式细胞仪酶联免疫试剂盒 |
大豆样品处理试剂盒 | 石蜡切片组织PDGF-A蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒定量PCR扩增pcr检测试剂盒 | GST融合蛋白甘肽树脂再生试剂盒 |
细胞磷酸二酯酶(50042.1)总活性酶连续循环光谱法定量pcr检测试剂盒 | 脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体 |
富含亮氨酸蛋白LRP130 | 促黑细胞激素γ1抗体 |
冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)高质绿色荧光测定试剂盒 | 真菌/酵母胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
食物乙酰舒泛(acesulfame K)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 组织甘油二脂酰激酶(DAG KINASE)酶连续循环比色法定量pcr检测试剂盒 |
转运蛋白3 | 血管生成素3/血管生成素4抗体 |
活化白细胞粘附分子 | APC标记人CD49d单克隆抗体 |
P53凋亡刺激蛋白2 | 颗粒溶素抗体 |
凝溶胶蛋白单克隆 | Recombinant Human NucleophosminTEX261蛋白抗体 |
细胞人体鼻病毒(rhinovirus)定量PCR扩增检测试剂盒 | G蛋白偶联受体82抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: Nucleophosmin;32.2 kDa; 1-294;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。