重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白属于 PP2C(蛋白磷酸酶 2C)家族,是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,广泛表达于人体组织中,在睾丸、骨骼肌和心脏中含量尤为丰富。其核心功能是作为细胞应激反应通路的负调控因子,通过去磷酸化作用调节多种信号转导级联反应;特别地,PPM1G 在 RNA 剪接过程中发挥关键作用,负责剪接因子的去磷酸化,这对功能性剪接体的形成至关重要,同时也参与细胞周期进程的调控。重组形式的 PPM1G 通常带有 His 标签,主要用于肿瘤生物学、RNA 代谢及细胞应激反应等领域的研究。
产品名 | Recombinant Human PPM1G | 分子量 | 60 kDa |
表达区间 | 1-546 | 货号 | XG-DB3058 |
别名
MGC1675, MGC2870, OTTHUMP00000123426, PP2C, PP2C gamma, PP2C-gamma, PP2CG, PP2Cgamma, PPM1G, PPM1G_HUMAN, PPP2CG, Protein phosphatase 1C, Protein phosphatase 1G, Protein phosphatase 2 catalytic subunit gamma isoform, Protein phosphatase 2C gamma isoform, Protein phosphatase 2C isoform gamma, Protein phosphatase magnesium dependent 1 gamma, Protein phosphatase magnesium-dependent 1 gamma
宿主; E.Coli
表达区间; 1-546
分子量; 60 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
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肿瘤/睾丸抗原50 | 血管内皮锌指蛋白1抗体 |
磺酰脲类药物受体1 | APC标记人CD41单克隆抗体 |
p21激活激酶2 | 抗表皮生长因子抗体 |
膜粘连蛋白 A4重组鼠单克隆 | Recombinant Human PPM1GSymplekin蛋白抗体 |
线虫补骨脂素(4-trimethylpsoralen)诱导突变试剂盒 | G蛋白偶联受体18抗体 |
关键字: PPM1G;60 kDa; 1-546;
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