重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白的核心价值在于模拟了真核细胞内RNA聚合酶II的“尾部”结构。这个由约52个七肽重复单元组成的CTD结构域,是转录调控的中心枢纽。其功能主要通过重复序列中多个氨基酸位点(特别是Tyr1、Ser2、Thr4、Ser5、Ser7)的动态可逆磷酸化修饰来实现。这种复杂的“CTD密码”就像一个招募平台,通过不同的磷酸化组合模式,时空特异性地招募转录起始、延伸、终止所需的因子,以及mRNA加帽、剪接、多聚腺苷酸化和核输出等RNA加工机器,从而将转录与RNA加工过程紧密偶联。重组的YSPTSPS重复蛋白主要用于
产品名称; Recombinant Human RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS
别名; DNA directed RNA polymerase II A, DNA-directed RNA polymerase II largest subunit RNA polymerase II 220 kd subunit, DNA-directed RNA polymerase II subunit A, DNA-directed RNA polymerase II subunit RPB1, DNA-directed RNA polymerase III largest subunit, hRPB220, hsRPB1, POLR2, Polr2a, POLRA, Polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide A, Polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide A 220kDa
宿主; E.Coli
表达区间; 1586-1951
分子量; 40.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
羧酸酯酶6 | HARRIS苏木素复染试剂盒 |
EYA3蛋白 | 细胞PDGF-B蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
乳制品琥珀酸比色法定量pcr检测试剂盒 | 石蜡切片组织CASPASE-7蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR扩增pcr检测试剂盒 | GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)激酶标记试剂盒 |
组织BTK激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 硫辛酰胺脱氢酶抗体 |
干扰素调节因子1 | 蛋白酶激活受体-2抗体 |
BrdU标记法载玻片细胞繁殖荧光显微镜pcr检测试剂盒 | 组织诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
动物硬组织可溶性膜蛋白(粗提)制备试剂盒 | 细胞ZAP70激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
肿瘤抑制因子FBW7 | 胰羧肽酶A1抗体 |
肌球蛋白2 | 6号染色体开放阅读框70抗体 |
PE标记人CD56 (NCAM)单克隆 | 淋巴细胞抗原6重复位点蛋白G6F抗体 |
AF680标记的甲胎蛋白 | Recombinant Human RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPSZSWIM5蛋白抗体 |
蓝藻菌A+ 培养液 | KRI1蛋白抗体 |
关键字: RNA polymerase II CT;40.2 kDa ; 1586-1951;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。