重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
该蛋白是RNA 聚合酶 II(RNA Polymerase II, Pol II)复合物的核心亚基之一,分子量约为 12 kDa。作为中介体复合物(Mediator Complex)的组成部分,RPC8 在转录起始过程中扮演着关键的桥梁角色,它负责将基因特异性的转录因子(Transcription Factors)与核心转录机器(RNA 聚合酶 II)连接起来,从而精确调控基因的表达水平。RPC8 对于 RNA 聚合酶 II 的组装、稳定以及在启动子区域的正确定位至关重要,进而影响 mRNA 的合成效率。
产品名称; Recombinant Human RPC8
别名; DNA directed polymerase III subunit 22.9 kDa polypeptide, DNA directed RNA polymerase III subunit H, DNA directed RNA polymerase III subunit RPC8, POLR3H, Polymerase (RNA) III (DNA directed) polypeptide H (22.9kD), RNA nucleotidyltransferase (DNA directed), RNA polymerase III subunit C8, RPC8
宿主; E.Coli
表达区间; 1-204
分子量; 22.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
碳水化合物磺基转移酶14 | 冰冻切片组织K(CATHEPSIN K)活性原位荧光染色酶联免疫试剂盒 |
ENTHD1蛋白 | CASPASE-1蛋白表达ELISA定量酶联免疫试剂盒 |
饮料丙三醇比色法定量pcr检测试剂盒 | 石蜡切片组织RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞培养污染性支原体属(Mycoplasma)鉴定 | 组织精(arginine)含量化学比色法定量酶联免疫试剂盒 |
组织MKK6激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 氯离子通道蛋白3抗体 |
肝癌衍生生长因子/高迁移率族蛋白1样蛋白2 | 二氢嘧啶抗体 |
植物氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒(超氧阴离子) | 全组织氧化酶活性染色试剂盒 |
动物糖蛋白电泳迁移pcr检测试剂盒 | 细胞组蛋白脱乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
周期素依赖性激酶1 | 氧固醇结合蛋白样1A抗体 |
肌微管蛋白MTMR5 | 8号染色体开放阅读框76抗体 |
PE标记人CD106单克隆 | 李斯特菌溶胞素抗体 |
AF555标记的程序性死亡配体1 | Recombinant Human RPC8白细胞分化抗原CD2AP抗体 |
植物醛酮还原酶(aldo-keto reductase)总活性比色法定量检测试剂盒 | LRRC39蛋白抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: RPC8;22.3 kDa; 1-204;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。