人胃黏膜上皮细胞
产品信息：
英文名称 | Human Gastric Mucosal Epithelial Cells | 种属 | 人 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1286 |
组织来源 | 胃组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介：
人胃黏膜上皮分离自胃黏膜组织；胃黏膜柔软，活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞，充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞，突向腔内称幽门瓣。胃黏膜可分为三层，即上皮层（单层柱状上皮）、固有层（由结缔组织构成、含有大量的胃腺）和黏膜肌层（为薄层平滑肌、排列成内环外纵）。胃黏膜上皮细胞源自胃黏膜的上皮层，细胞为单层柱状上皮，排列整齐，能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面，防止胃酸和对胃黏膜的损害。体外培养胃黏膜上皮细胞为研究细胞功能及致病因子、药物、激素对细胞的损伤、保护和功能调控提供了简单而的模型。
方法简介 公司实验室分离的人胃黏膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人胃黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作技巧与注意事项：
成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：
严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。
保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程：
消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。
酶液应新鲜配制，避免活性下降。
控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。
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细胞培养操作
消化培养法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm³），以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10⁵ cells/mL）。
将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO₂ 培养箱中静置培养。
关键字： 人胃黏膜上皮细胞;胃组织;贴壁;
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