兔胃黏膜上皮细胞
产品信息:

英文名称:Rabbit Gastric Mucosal Epithelial Cells
组织来源:胃
默认种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
产品名称 | 兔胃黏膜上皮细胞 | 组织来源 | 胃 |
英文名称 | Rabbit Gastric Mucosal Epithelial Cells | 货号 | A01X2048 |
方法简介 实验室分离的兔胃黏膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的兔胃黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
细胞简介:

兔胃黏膜上皮分离自胃黏膜组织;胃黏膜柔软,活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞,充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞,突向腔内称幽门瓣。胃黏膜可分为三层,即上皮层(单层柱状上皮)、固有层(由结缔组织构成、含有大量的胃腺)和黏膜肌层(为薄层平滑肌、排列成内环外纵)。胃黏膜上皮细胞源自胃黏膜的上皮层,细胞为单层柱状上皮,排列整齐,能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面,防止胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的损害。体外培养胃黏膜上皮细胞为研究细胞功能及致病因子、药物、激素对细胞的损伤、保护和功能调控提供了简单而的模型。
培养信息:

包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔胃黏膜上皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养操作:

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。
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获取与培养的挑战:
尽管价值巨大,但原代细胞的研究和应用也面临着显著的挑战:
获取困难:需要从新鲜组织中分离,对取材时间(通常在4-6小时的黄金窗口期内)、无菌操作和组织活性都有极高要求。
培养苛刻:原代细胞非常脆弱,需要特定的、成分复杂的培养基和生长因子,对培养环境(如温度、pH值)极为敏感。
批次差异:由于来源于不同的供体,不同批次的细胞在遗传背景和生理状态上存在固有差异,这给实验的可重复性带来了挑战。
成本高昂:从获取、分离到培养,整个过程耗时、费力且昂贵。
关键字: 兔胃黏膜上皮细胞;胃;贴壁;
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