费氏另类弧菌

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费氏另类弧菌（Vibrio fischeri），又称费氏弧菌，是弧菌科弧菌属的革兰氏阴性杆菌，具单极鞭毛，运动活泼，兼性厌氧，能产生生物荧光，通过群体感应调控发光。广泛分布于海洋环境中，与发光鱿鱼、发光鱼类等形成共生关系，寄居在宿主的发光器官中，帮助宿主觅食、躲避捕食者或求偶；其生物发光特性可用于环境监测、基因工程标记及群体感应机制研究，是微生物行为学研究的重要模式菌株。
培养基  蛋白胨：5.0，酵母膏：1.0，柠檬酸铁：0.1，溴化钾：0.08，NaCl：19.45，MgCl2：5.98，Na2SO4：3.24，CaCl2：1.8，KCl：0.55，Na2CO3：0.16，Na2NO3：0.0016，Na2HPO4：0.008，氯化锶：0.034，硼酸：0.022，硅酸钠：0.004，氟化钠：0.0024，琼脂：15.0，pH：7.4-7.8（25℃）

生长条件  20℃；48-72h；好氧

存储条件  -80℃

安全等级  1

形态  菌落直径为1-2mm，圆形，边缘不整齐，不透明，正面白色，颜色较浅，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯

模式菌株  no

操作步骤  ①将冻存管进行水浴25℃溶解，快速振摇溶解；②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒，随后转移至安全柜操作；③旋开管盖，将溶解液全部吸出，打入1-2个琼脂平板（每块平板约200μL，培养厌氧菌需将培养基提前置于厌氧环境中除氧24h）；④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养。

应用领域  水或污水毒性检测。

共享方式  公益性共享

菌种保藏方法：

一、传代保存法

对于一些稳定性不高，对环境变化较为敏感的微生物菌种，一般只能采用传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存，它是最基本的微生物保存法。

二、液体石蜡覆盖保存法

该法适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。此法可防止干燥，并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。其方法简便，且适用于不宜冷冻干燥的微生物(如产孢能力低的丝状菌)的保存。

三、悬液保存法

这是一种使微生物混悬于适当溶液中进行保存的方法，具体方法有：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

四、载体保存法

将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下几种：

①土壤保存法；

②砂土保存法；

③硅胶保存法；

④磁珠保存法；

⑤麸皮保存法

⑥纸片(滤纸)保存法。

实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

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