产品介绍：
大鼠纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其他相关液体样本中PAP浓度的科研工具。该试剂盒广泛应用于高纤溶酶血症和溶栓治疗相关的临床与科研领域，通过检测PAP复合物水平，可评估纤溶系统的活化状态及出血风险。
产品名称 | 大鼠纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat PAP ELISA |
规格 | 48T/96T | 货号 | A117102 |
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，实验时长约为2-4小时。酶标板已预先包被能特异性识别PAP的抗体。加入标准品或待测样本后，PAP与包被抗体结合。洗去未结合物质后，加入生物素标记的检测抗体，形成抗体-PAP-生物素-检测抗体复合物。随后加入HRP-链霉亲和素，再洗板后加入TMB显色底物，TMB在HRP催化下呈蓝色，加入终止液后变为黄色。颜色深浅与样本中PAP浓度呈正比。
主要组成
酶标板（预包被抗体）
标准品（用于制作标准曲线）
样品稀释液
检测抗体（生物素标记）
HRP-链霉亲和素
洗涤液
显色剂（TMB）
终止液
封板膜、说明书等
实验流程
样本准备：血清、血浆等需按要求采集和处理，避免溶血和脂血，样本应尽快检测或妥善保存于-20℃。
加样：设空白孔、标准孔、样本孔，加入相应试剂，37℃孵育30-60分钟。
洗涤：充分洗涤5次，去除未结合物。
加检测抗体和酶结合物：加入生物素化抗体和HRP-链霉亲和素，孵育并洗涤。
显色与终止：加入TMB显色5-10分钟，加终止液终止反应。
读数与计算：用酶标仪在450nm波长测定OD值，根据标准曲线计算样本浓度。
产品特性
灵敏度高：最小可检测浓度可达3.5pg/mL
检测范围宽：7.8-500pg/mL
精密度好：批内差CV<10%，批间差CV<13%
稳定性强：试剂盒活性在有效期内降低率<5%
适用性广：适用于血清、血浆、尿液、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等多种液体样本
保存与有效期
保存条件：2-8℃冷藏，避免冷冻和阳光直射
有效期：通常为6-12个月，具体见产品说明
注意事项
试剂盒从冷藏环境取出后需平衡15-30分钟
洗涤过程至关重要，不充分易造成假阳性
一次加样时间最好控制在5分钟内
如样本浓度高，需预先稀释
不同批号试剂勿混用
所有样本和试剂按传染物处理
ELISA试剂盒的主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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