产品介绍：
大鼠组织纤溶酶原激活物(tPA)ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠样本中组织型纤溶酶原激活因子（t-PA）浓度的科研工具，广泛适用于血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等多种生物液体。该试剂盒基于双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，通过特异性抗体识别t-PA抗原，结合酶标系统催化显色反应，利用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度（OD值），进而根据标准曲线计算样本中t-PA的浓度。
产品名称 | 大鼠组织纤溶酶原激活物(tPA)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat tPA ELISA |
规格 | 48T/96T | 货号 | A116540 |
检测原理
双抗体夹心ELISA法（Sandwich ELISA）
适用样本类型 血清、血浆（EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝）、细胞上清、组织匀浆、尿液、脑脊液等
检测范围 通常为 0.156–10 ng/mL 或 0.31–20 ng/mL（依品牌而异）
灵敏度 最低检测限可达 0.094–0.19 ng/mL
特异性 可检测天然或重组大鼠t-PA，与其他细胞因子无明显交叉反应
重复性 批内和批间变异系数通常 <10%，部分产品批内CV<8%
试剂盒规格 常见为96T或48T，部分品牌提供预包被微孔板，使用方便
操作流程简述
包被抗体：微孔板已预包被抗大鼠t-PA抗体；
加样孵育：加入标准品或待测样本，37℃孵育1–2小时；
洗涤：洗去未结合物质；
加酶标抗体：加入HRP标记的检测抗体，继续孵育；
显色：加入TMB底物，避光反应生成蓝色产物；
终止：加入硫酸终止液，颜色由蓝变黄；
读数：450 nm测定OD值，绘制标准曲线并计算浓度。
?? 保存与有效期
储存条件：2–8℃避光保存，避免反复冻融；
有效期：一般为6个月至1年；
注意事项：洗涤液可能出现结晶，属正常现象，可水浴加热溶解后使用。
使用提示与关键建议
样本处理：
血清：室温静置2小时或4℃过夜后离心取上清；
血浆：采集后30分钟内离心，避免溶血；
组织匀浆：建议使用预冷PBS清洗组织，冰上研磨，超声破碎可提高提取效率。
避免交叉污染：使用一次性吸头，不同试剂分装使用；
温育时间控制：建议每次加样时间不超过5分钟，确保反应一致性；
仅用于科研：所有试剂盒均明确标注“不用于临床诊断”。
ELISA试剂盒的主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字： 大鼠组织纤溶酶原激活物; tPA;ELISA试剂盒;
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