产品介绍：
1. 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，通过特异性识别大鼠TECK/CCL25（胸腺表达的趋化因子）的抗体对，实现高灵敏度检测。微孔板预包被抗CCL25抗体，样本中的CCL25与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物，再通过HRP-链霉亲和素系统催化TMB显色。
产品名称 | 大鼠TECK/CCL25elisa试剂盒 | 英文名称 | RatTECK/CCL25 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129814 |
2. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件
预包被微孔板 96孔 2-8℃
CCL25标准品 0-1000pg/mL -20℃
生物素标记抗体 120μL -20℃
HRP-链霉亲和素 120μL -20℃
TMB底物 10mL 2-8℃（避光）
终止液 10mL 室温
20×洗涤缓冲液 50mL 室温
3. 技术参数
检测范围：15.6-1000pg/mL
灵敏度：<5pg/mL
样本类型：血清、血浆、胸腺组织匀浆、肠系膜淋巴结匀浆
检测时间：约4小时
批内变异：<7%
批间变异：<10%
回收率：85-115%
4. 样本处理
血清/血浆：采集后立即离心（1000×g，10min）
组织匀浆：
胸腺组织按1:9（w/v）加入PBS匀浆
4℃ 5000×g离心5min取上清
保存条件：
短期（1周）：2-8℃
长期：-80℃分装保存（避免反复冻融）
实验步骤
标准品配制：梯度稀释（0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000pg/mL）
加样孵育：100μL/孔，37℃2小时
洗涤：自动洗板机清洗5次（300μL/孔）
加检测抗体：100μL/孔，37℃1小时
加酶结合物：100μL/孔，37℃30分钟
显色：TMB避光显色15-20分钟
终止检测：450nm主波长，630nm参比波长
6. 应用领域
胸腺发育研究：T细胞成熟与迁移机制
肠道免疫研究：肠黏膜淋巴细胞归巢
炎症性肠病：克罗恩病、溃疡性结肠炎模型
肿瘤免疫：CCL25在肿瘤微环境中的作用
ELISA试剂盒的主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字： 大鼠;TECK/CCL25;ELISA试剂盒;
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