兔TECK/CCL25elisa试剂盒
产品简介:
兔TECK/CCL25 ELISA试剂盒是一种专为定量检测兔血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液等样本中胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25)含量设计的高灵敏度、特异性试剂盒,广泛应用于免疫、炎症、淋巴细胞归巢、肿瘤及自身免疫性疾病等领域的科研实验。
英文名称 | Rabbit TECK/CCL25 ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A130021 | 规格 | 48T/96T |
1. 检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Sandwich ELISA):
酶标板微孔预先包被抗兔TECK/CCL25特异性抗体;
样本中的TECK/CCL25与固相抗体结合,再加入酶标记的检测抗体,形成免疫复合物;
加入显色底物(如TMB),酶催化反应生成有色产物,颜色深浅与TECK/CCL25浓度成正比;
用酶标仪在450 nm波长测定吸光度,通过标准曲线计算样本浓度。

2. 主要组成
预包被微孔板(96孔或48孔)
酶标检测抗体(HRP-抗TECK/CCL25)
标准品(冻干品或预稀释液)
样品稀释液、洗涤液、底物液、终止液
封板膜、说明书
3. 检测步骤(简要)
将标准品和待测样本加入微孔,37℃孵育1~2小时;
洗涤微孔板,去除未结合物质;
加入酶标抗体,37℃孵育1小时;
再次洗涤,加入底物液,避光显色;
加终止液,酶标仪读数,依据标准曲线计算样本浓度。
4. 保存与注意事项
试剂盒2-8℃保存,有效期6个月至1年,避免反复冻融和阳光直射;
样本长期保存建议分装于-20℃或-80℃;
检测前需将试剂恢复至室温,严格按说明书操作,避免交叉污染。
应用领域
免疫调节、炎症、淋巴细胞归巢机制、肿瘤微环境、自身免疫病研究
药物开发与疗效评价等领域。
总结:
兔TECK/CCL25 ELISA试剂盒是研究胸腺表达趋化因子及其在免疫、炎症、肿瘤等相关疾病中作用的高效、特异工具,操作简便,灵敏度高,结果可靠,适合科研用户在上述领域开展应用。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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