产品介绍：
是一种用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中CCL5/RANTES蛋白的高灵敏度、高特异性的酶联免疫吸附检测试剂盒。以下是其主要特点：
产品名称 | 人CCL-5/RANTESelisa试剂盒 | 英文名称 | Human CCL-5/RANTES ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129729 |
检测原理
采用双抗体夹心ELISA法。预包被的酶标板上固定有特异性抗人CCL5抗体，加入标准品或样本后，CCL5与抗体结合。再加入生物素化的检测抗体，形成免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，催化底物TMB显色，颜色深浅与CCL5浓度成正比，通过酶标仪测定450nm波长的吸光度进行定量。
性能特点
灵敏度高：最小检测限可达3pg/ml至14.8pg/ml。
特异性强：与人ANG、EGF、Epo等多种细胞因子无交叉反应。
重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。
样本类型
适用于检测人血清、血浆及细胞培养上清液中的CCL5/RANTES水平。
试剂盒组成
预包被抗体的酶标板
标准品
生物素化检测抗体
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素
洗涤液、底物液、终止液等。
检测步骤
加样：加入标准品和样本。
温育：与抗体结合。
洗涤：去除未结合物质。
加检测抗体：形成夹心复合物。
加酶标抗体：与生物素结合。
显色：加入底物TMB。
终止：加入终止液。
ELISA试剂盒的主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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