兔CCL-5/RANTESelisa试剂盒
产品简介:
兔CCL-5/RANTES ELISA试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、细胞培养上清液等样本中CCL-5(又称RANTES)的含量。CCL-5是一种趋化因子,对T细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞具有趋化作用,参与炎症反应和免疫调节,在肿瘤、自身免疫疾病等研究中具有重要意义。
英文名称 | Rabbit CCL-5/RANTES ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A130005 | 规格 | 48T/96T |

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
酶标板上预包被抗兔CCL-5特异性抗体,样本中的CCL-5与抗体结合,加入酶标检测抗体后形成夹心复合物,催化底物显色,颜色深浅与CCL-5浓度成正比。
试剂盒组成
预包被抗体的酶标板
标准品(冻干品,需复溶)
生物素标记抗体
酶结合物(如HRP-链霉亲和素)
样本稀释液
洗涤液
显色底物(TMB)
终止液
操作步骤
样本准备:血清、血浆或细胞培养上清等,建议做复孔。
加样:加入标准品和待测样本,37℃孵育90分钟。
洗涤:洗板2-5次,去除未结合物质。
加酶标抗体:加入生物素化抗体,37℃孵育60分钟。
显色与终止:加入TMB底物避光反应,终止液终止反应。
读数:酶标仪450 nm测定吸光度,根据标准曲线计算CCL-5浓度。
注意事项
不同批号试剂盒组分不可混用,避免交叉污染。
标准品为一次性使用,溶解后不可反复冻融。
实验过程中,样本和试剂需提前平衡至室温。
严格控制孵育时间及洗涤步骤,以保证结果准确性。
试剂盒应2-8℃冷藏保存,未用完的板条密封冷藏。
应用领域
用于兔炎症、肿瘤、免疫相关疾病等机制研究。
可支持细胞生物学、病理学及药物开发等方向的科学实验。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
关键字: 兔;CCL-5/RANTES;ELISA试剂盒;
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