产品介绍：
基本原理
HSP70 ELISA试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Sandwich ELISA)原理：
特异性抗体预包被在微孔板上
样本中的HSP70与包被抗体结合
加入生物素标记的检测抗体形成抗体-抗原-抗体复合物
加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素
加入TMB底物显色，颜色深浅与HSP70浓度成正比
产品名称 | 人HSP70elisa试剂盒 | 英文名称 | Human HSP70 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129761 |
主要组成
预包被微孔板：96孔或48孔，包被抗人HSP70单克隆抗体
标准品：重组人HSP70蛋白，通常提供6-8个浓度梯度(如0、31.25、62.5、125、250、500、1000 pg/mL)
检测抗体：生物素标记的抗人HSP70抗体
酶结合物：HRP标记的链霉亲和素
显色底物：TMB(四甲基联苯胺)溶液
终止液：酸性溶液(通常为1M或2M硫酸)
洗涤缓冲液：20-25×浓缩PBS-Tween20
样本稀释液：用于稀释高浓度样本
技术参数
检测范围：通常15.6-1000 pg/mL(不同厂家略有差异)
灵敏度：最低检测限通常<10 pg/mL
特异性：可检测人HSP70，与HSP90、HSP60等无交叉反应
精密度：板内变异系数<10%，板间变异系数<15%
样本类型：血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆液
样本体积：通常需要50-100μL
总检测时间：约3-4小时(不包括样本准备时间)
操作步骤(简要)
标准品和样本加入预包被孔中，孵育
洗涤后加入生物素标记抗体，孵育
洗涤后加入酶结合物，孵育
洗涤后加入TMB底物显色
加入终止液终止反应
450nm波长读取吸光度(参考波长630nm)
应用领域
疾病研究：HSP70与肿瘤、心血管疾病、神经退行性疾病等相关
应激反应研究：热休克、氧化应激等条件下HSP70表达变化
药物开发：评估药物对HSP70表达的影响
临床诊断：某些疾病的辅助诊断标志物
注意事项
不同批号试剂不可混用
避免反复冻融标准品和样本
严格按照说明书推荐的样本稀释比例
显色时间需严格控制
实验过程中需避免污染
使用前所有试剂需平衡至室温(18-25℃)
储存条件
未开封试剂盒通常需2-8℃保存，有效期一般为6-12个月。开封后部分组分可能需要-20℃保存。
试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
关键字： 人;HSP70 ;ELISA试剂盒;
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