兔HSP70elisa试剂盒
产品简介:
兔HSP70 ELISA试剂盒是专为定量检测兔血清、血浆、组织匀浆、细胞上清等样本中热休克蛋白70（HSP70）含量而设计的科研工具。该试剂盒采用双抗体夹心法ELISA原理，具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性，广泛应用于细胞应激、免疫学、肿瘤及代谢等研究领域。
英文名称 | Rabbit HSP70 ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A130070 | 规格 | 48T/96T |
英文名称：Rabbit Heat Shock Protein 70 (HSP-70) ELISA Kit
检测样本类型：血清、血浆（EDTA/柠檬酸盐/肝素）、组织匀浆、细胞上清、尿液等
规格：96T/48T（可检测约90或46个样本，含标准品孔）
保存条件：2–8℃冷藏，避光保存
有效期：6个月
检测原理
采用双抗体夹心法ELISA：
酶标板预先包被抗兔HSP70特异性抗体；
加入待测样本或标准品，样本中的HSP70与抗体结合；
洗涤后加入酶标检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物；
显色反应后，酶标仪450nm测定吸光度，通过标准曲线计算HSP70浓度。
主要组成
组分 规格（96T） 说明
预包被酶标板 1块（96孔） 抗体包被，即用型
标准品 6瓶（冻干品） 用于标准曲线
酶标抗体 1瓶（120μL） HRP标记，需稀释
样本稀释液 1×20ml 即用型
洗涤缓冲液 1×20ml（浓缩） 使用前稀释25倍
底物A、B 各10ml 避光保存，现配现用
终止液 1×10ml 强酸，小心操作
封板膜 1张 一次性使用，防污染
样本处理
血清/血浆/组织匀浆/细胞上清：采集后1000×g离心10–20分钟，取上清立即检测或–70℃保存，避免反复冻融。
注意事项：避免溶血与高血脂样本，操作需严格遵循说明书。
性能指标
检测范围：0.156-10 ng/mL（不同品牌有所差异）
灵敏度：最低可检测0.057 ng/mL
特异性：不与其它热休克蛋白或细胞因子发生交叉反应
重复性：板内变异<10%，板间变异<15%
线性相关性：R2≥0.92
操作要点
所有试剂使用前需平衡至室温（20–25℃）；
标准品和样本建议做复孔；
显色反应避光进行，终止后15分钟内读数；
标准曲线采用四参数Logistic回归或线性拟合；
浓度结果如进行了样本稀释，需乘以稀释倍数。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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