人Serum Amyloid(SAA)elisa试剂盒
产品简介:
1. 试剂盒基本信息
检测目标：人血清淀粉样蛋白A（Serum Amyloid A, SAA）
检测方法：双抗体夹心ELISA（Sandwich ELISA）
英文名称 | Human Serum Amyloid(SAA) ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A129730 | 规格 | 48T/96T |
样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素）、细胞培养上清、关节液等
灵敏度：<1.0 ng/mL（高灵敏度版本可达<0.5 ng/mL）
检测范围：3.125-200 ng/mL（部分高范围试剂盒1.56-400 ng/mL）
检测时间：约2.5小时（快速检测试剂盒约1.5小时）
特异性：不与CRP、IL-6等其他炎症标志物交叉反应
2. 试剂盒组成（96孔板）
组分 规格 保存条件 说明
预包被微孔板 8×12孔 2-8℃ 抗人SAA单抗包被
SAA标准品 冻干粉×1 -20℃ 复溶后0-200 ng/mL
检测抗体 120 μL -20℃ 生物素标记抗人SAA
酶结合物 120 μL -20℃ Streptavidin-HRP
TMB底物 10 mL 4℃（避光） 即用型
终止液 10 mL RT 1M H?SO?
洗涤液 50 mL RT 20×浓缩液
样本稀释液 20 mL 2-8℃ 含蛋白稳定剂
3. 检测原理
捕获阶段：样本SAA与预包被抗体结合
检测阶段：生物素化二抗特异性识别SAA
信号放大：Streptavidin-HRP催化TMB显色
定量分析：450nm吸光度与SAA浓度成正比
4. 实验操作流程
样本准备：
血清/血浆：室温静置30分钟后，1000×g离心15分钟
关节液：10000×g离心10分钟去除颗粒物
细胞上清：直接检测或适当稀释
标准曲线制备：
graph LR
A[标准品复溶] --> B[系列稀释]
B --> C[0,3.125,6.25,12.5,25,50,100,200 ng/mL]
检测步骤：
加样：100μL/孔（标准品/样本）
孵育：37℃ 90分钟
洗涤：自动洗板机洗5次
加检测抗体：37℃ 60分钟
加酶结合物：37℃ 30分钟
显色：室温避光15分钟
终止：50μL/孔终止液
读数：450nm（参考630nm）
5. 数据分析
标准曲线拟合：
（对数线性回归方程）
质量控制要求：
标准曲线R2>0.98
复孔CV<12%
质控样本回收率90-110%
临床应用价值
感染性疾病：
细菌感染早期诊断（优于CRP）
脓毒症预后评估
自身免疫病：
类风湿关节炎活动度监测
系统性红斑狼疮病情评估
心血管疾病：
动脉粥样硬化风险预测
冠心病患者炎症状态评估
肿瘤监测：
肿瘤相关炎症标志物
化疗后感染监测
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
关键字： 人;Serum Amyloid(SAA) ;ELISA试剂盒;
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