产品介绍:

人血小板反应素-1(Thrombospondin-1, THBS-1)ELISA试剂盒用于定量检测人体样本(如血清、血浆等)中的THBS-1水平。THBS-1是一种多功能的细胞外基质糖蛋白,参与细胞黏附、迁移、血管生成及炎症反应等多种生物学过程,在心血管疾病、肿瘤及纤维化疾病中具有重要的研究价值。
产品名称 | 人Thrombospondin-1elisa试剂盒 | 英文名称 | Human Thrombospondin-1 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129764 |

检测原理
双抗体夹心法ELISA:微孔板预包被抗人THBS-1抗体,样本中的THBS-1与生物素标记的检测抗体结合,再与HRP标记的链霉亲和素反应,加入TMB底物后显色,颜色深浅与THBS-1浓度呈正相关,酶标仪在450 nm波长处读数。
主要组成

预包被酶标板(96/48孔)
THBS-1标准品(多个浓度梯度)
生物素化检测抗体
HRP标记链霉亲和素
底物溶液(TMB)、终止液(硫酸)
洗涤缓冲液、样本稀释液、封板膜等辅助试剂
检测流程

加样:标准品/样本+生物素化检测抗体+HRP标记链霉亲和素
洗涤:每孔加满洗涤液,重复5次
显色:加入底物溶液,避光反应10-15分钟
终止:加入终止液
读数:酶标仪450 nm波长测定OD值
性能指标

检测范围:通常为0.78-50 ng/mL(具体以说明书为准)
灵敏度:最小可检测浓度小于26.39 pg/mL
特异性:仅与人类THBS-1反应,不与其他相关蛋白显著交叉反应
重复性:板内变异系数≤10%,板间变异系数≤15%
临床与研究意义
心血管疾病研究:THBS-1参与血管生成、血栓形成及动脉粥样硬化等过程,检测其水平有助于评估心血管疾病风险及进展。
肿瘤研究:THBS-1在肿瘤血管生成及转移中具有双重作用,其表达水平变化可为肿瘤诊断和预后评估提供参考。
纤维化疾病研究:THBS-1在肝纤维化、肺纤维化等疾病中促进细胞外基质沉积,检测其水平有助于研究纤维化机制。
样本要求
血清/血浆:避免溶血和反复冻融。
其他样本:如细胞培养上清、组织匀浆,需经适当处理和稀释。
注意事项

试剂盒需2-8℃保存,有效期一般为6个月。
实验前平衡至室温,严格按照说明书操作。
建议设空白对照、标准曲线和样本复孔,确保结果准确可靠。
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
关键字: 人;Thrombospondin-1;ELISA试剂盒;
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