人Total GLP-1elisa试剂盒
产品简介:
1. 试剂盒概述
检测目标：人总胰高血糖素样肽-1（Total GLP-1），包括活性形式（GLP-1(7-36)酰胺/GLP-1(7-37)）和失活形式（GLP-1(9-36)酰胺/GLP-1(9-37)）。
检测原理：双抗体夹心ELISA（Sandwich ELISA），特异性识别GLP-1的N端或C端表位。
样本类型：血清、血浆（需含DPP-4抑制剂，如抑肽酶或EDTA）、细胞培养上清液。
英文名称 | Human Total GLP-1 ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A129727 | 规格 | 48T/96T |
2. 试剂盒组成
通常包含以下组分（以说明书为准）：
预包被微孔板：抗人GLP-1单克隆抗体包被的96孔板。
标准品：重组人GLP-1冻干粉（浓度范围通常为2-200 pM或等效pg/mL）。
检测抗体：生物素或HRP标记的抗人GLP-1二抗。
酶结合物：链霉亲和素-HRP（若检测抗体为生物素标记）。
显色底物：TMB（四甲基联苯胺）。
终止液：硫酸或盐酸溶液。
样本稀释液（含稳定剂，防止GLP-1降解）。
洗涤缓冲液（10-20×浓缩液）。
3. 检测原理
捕获：样本中的Total GLP-1与微孔板上固定的抗体结合。
信号放大：加入标记的二抗（如生物素化抗体）和酶结合物（链霉亲和素-HRP），形成复合物。
显色：TMB底物在HRP催化下显蓝色，终止后变为黄色。
检测：450nm波长下测OD值，浓度与吸光度成正比。
4. 主要应用
糖尿病研究：评估GLP-1在血糖调控中的作用（如2型糖尿病患者的GLP-1分泌缺陷）。
药物开发：监测GLP-1受体激动剂（如利拉鲁肽、司美格鲁肽）的疗效。
肥胖与代谢研究：GLP-1对食欲和能量代谢的影响。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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