兔Fetuin-Aelisa试剂盒
产品简介:
英文名称 | Rabbit Fetuin-A ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A129978 | 规格 | 48T/96T |
产品特点
高灵敏度与特异性：采用双抗体夹心法，能准确检测兔源的Fetuin-A，与其他蛋白无交叉反应。
广泛的适用性：适用于血清、血浆、细胞上清液等多种样本类型。
稳定的试剂组成：包含预包被抗体的酶标板、标准品、检测抗体、底物等，确保实验结果的可靠性。
实验步骤
样本准备：根据样本类型，进行适当的处理和稀释。
加样孵育：将样本和标准品加入酶标板，孵育以形成抗原-抗体复合物。
洗涤：去除未结合的物质。
显色与检测：加入底物溶液，显色后用酶标仪测定吸光度，通过标准曲线计算样本中Fetuin-A的浓度。
注意事项
样本处理：避免溶血、脂血等影响检测结果的因素。
试剂保存：试剂盒需在2-8℃保存，避免冻结。
操作规范：严格按照说明书操作，使用前平衡至室温，避免交叉污染。
适用领域
科研用途：适用于血清、血浆、细胞培养上清等多种样本类型。
应用领域：代谢疾病研究、肝功能评估等。
适用样本
血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等。
操作步骤
准备试剂和样本：平衡试剂盒至室温，制备标准品和样本。
加样：在酶标板孔中加入标准品、样本和相关试剂。
温育：37℃温育一定时间，使抗原抗体充分反应。
洗涤：洗去未结合的物质，避免干扰。
加酶标抗体：加入HRP标记的链霉亲和素，再次温育。
再次洗涤：洗去多余的酶标抗体。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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