诺氏梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 诺氏梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Clostridium novyi Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4007 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供DNA模板，试剂盒含预混反应体系。
高特异性：针对诺氏梭状芽孢杆菌保守序列设计引物，无交叉反应。
高灵敏度：检测下限达数百拷贝/反应。
闭管操作：一管式荧光定量PCR，避免气溶胶污染。
适用范围：科研用途（不可用于临床诊断）。
试剂盒组成
| 成分 | 包装规格 | 备注 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | 含荧光染料、dNTPs、酶等 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于标准品稀释 |
| PCR引物混合物 | 100 μL（白盖） | 特异性引物及探针 |
| PCR阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖/黄盖） | 非活体DNA片段 |
| 使用手册 | 1份 | 含操作流程及注意事项 |
自备试剂：DNA模板、10×ROX（依机型需求）。
操作流程
1. 阳性对照稀释（10²–10⁷拷贝/μL梯度制备）
在独立洁净区操作，使用带滤芯枪头避免污染。
取6管，分别加入45 μL稀释液，依次进行10倍梯度稀释（步骤详见说明书）。
2. PCR反应体系配制
反应体系（20 μL）：
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合物：2 μL
DNA模板：2 μL
ROX（可选）：依仪器要求添加
ddH₂O：补至20 μL
3. 扩增程序设置
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）
4. 数据分析
阈值循环数（Ct值）≤35判定为阳性，需结合阴性/阳性对照结果。
注意事项
分区操作：试剂准备区、样本处理区、扩增区需物理隔离，避免交叉污染。
防RNA降解：样本处理全程低温（0–4℃），使用无核酶耗材。
质量控制：每批次实验需设置阴/阳性对照。
安全规范：废弃物需无害化处理，实验服及器具分区专用。
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