生孢梭菌（生孢梭状芽孢杆菌）染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 生孢梭菌（生孢梭状芽孢杆菌）染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Clostridium sporogenes Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3221 |
产品概述
本试剂盒专为生孢梭菌（Clostridium sporogenes）的快速、高灵敏度检测设计，采用染料法荧光定量PCR技术，适用于科研用途。试剂盒基于生孢梭菌保守序列设计特异性引物，确保检测的高特异性和准确性，灵敏度可达几百拷贝/反应。
产品特点
即开即用：用户仅需提供DNA模板，操作简便。
高特异性：引物针对生孢梭菌保守区设计，避免与其他微生物交叉反应。
高灵敏度：检测限低至数百拷贝/反应，适用于低浓度样本。
闭管操作：一管式反应体系，减少气溶胶污染风险。
兼容性强：可与常见核酸提取试剂盒配合使用。
规格参数
包装规格：50次/盒（20μL反应体系）。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需低温。
适用机型：需自备10×ROX校正染料（根据机型选择）。
试剂盒组成
2×qPCR Magic Mix：500 μL（预混含染料、dNTPs、聚合酶等）。
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（用于标准曲线制备）。
qPCR引物混合液：100 μL（生孢梭菌特异性引物）。
实验步骤
1. DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
2. 标准曲线制备（定量检测需选做）
将阳性对照（1×10^8拷贝/μL）按10倍梯度稀释至1×10^2拷贝/μL，共6个浓度点。
每个浓度点设3个复孔，用于绘制标准曲线（Ct值-log浓度）。
3. PCR反应体系
每20 μL反应体系包含：
10 μL 2×qPCR Magic Mix
2 μL引物混合液
2 μL DNA模板
6 μL无核酸酶水
4. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 45 sec |
5. 数据分析
定性检测：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。
定量检测：根据标准曲线计算样本拷贝数。
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作分区建议：样本制备区、扩增区、分析区严格分离。
避免反复冻融试剂，使用前需充分离心混匀。
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