气肿疽梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Clostridium chauvoei Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4013
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对气肿疽梭状芽孢杆菌基因保守区域设计特异性引物。在含有目标核酸模板的反应体系中，PCR扩增过程中SYBR Green染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过实时监测荧光强度，实现对靶标核酸的定性和定量分析。
主要组分
预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及SYBR Green染料；
引物混合液：特异性扩增气肿疽梭状芽孢杆菌靶基因的引物对；
阳性对照：含气肿疽梭状芽孢杆菌靶基因片段的质粒DNA；
阴性对照：无核酸酶水。
保存条件
-20℃避光保存，避免反复冻融。有效期12个月。
适用仪器
兼容主流实时荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等）。
操作步骤
样本处理：按标准方法提取待测样本DNA；
反应体系配制：每反应需加入预混液10 μL、引物混合液2 μL、模板DNA 3 μL，补足无核酸酶水至20 μL；
PCR程序：
预变性：95℃ 3分钟；
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
数据分析：根据扩增曲线和Ct值判定结果。
性能参数
灵敏度：≤10拷贝/反应；
特异性：不与常见近缘梭状芽孢杆菌交叉反应；
重复性：Ct值变异系数（CV）≤5%。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免污染；
试剂解冻后需充分混匀并短暂离心；
建议设置复孔以提高检测可靠性。
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