艰难梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 艰难梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Clostridioides difficile Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4012 |
产品概述
本试剂盒采用SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，专用于艰难梭状芽孢杆菌（Clostridioides difficile）的定性和定量检测，尤其针对其毒素基因（如tcdA、tcdB）及16S rDNA保守区。试剂盒包含优化引物、标准化克隆质粒阳性对照及荧光PCR反应体系，适用于科研及临床样本中病原体增殖状态的精准分析。
技术特点
高灵敏度与特异性
引物基于艰难梭状芽孢杆菌高度保守序列设计（如通用引物515F/806R及特异性引物CD16F/CD16R），避免与其他微生物DNA交叉反应。
检测限低至10²拷贝/μL（tcdA基因）或10²~10³拷贝/μL（tcdB基因），线性范围覆盖5~7个数量级。
标准化质粒对照
提供含目标基因片段的克隆质粒作为阳性对照，确保反应稳定性和结果可靠性，避免活菌操作风险。
操作便捷性
无需探针合成，SYBR Green染料法简化流程并降低成本。
支持20μL反应体系，单盒可完成50次检测。
检测流程
标准曲线制备
使用梯度稀释（如10²~10⁷拷贝/μL）的质粒标准品，在独立区域操作以防污染。
标记离心管并加入专用稀释液，按说明书进行系列稀释。
PCR扩增
反应体系包含酶混合液、引物及模板DNA，循环条件参照仪器推荐参数。
无效样本判定：CT值＞25或无CT值，或ΔCT＜0时需重复检测。
数据分析
通过标准曲线计算样本中目标基因拷贝数，批内/批间变异系数（CV）均低于2%，确保结果可重复性。
注意事项
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。
避免试剂组分交叉污染，推荐使用带滤芯枪头。
标准品需严格保存于-20℃，避免反复冻融。
储存与运输
试剂盒保存于-20℃避光环境，有效期12个月。
运输需使用干冰或冰袋维持低温。
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