检验原理
本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对马蛔虫(Parascaris equorum)基因高度保守区域设计特异性引物，通过荧光PCR技术对马蛔虫核酸进行体外扩增检测。当反应体系中含有马蛔虫核酸模板时，PCR反应将进行并释放荧光信号，仪器可实时监测和输出相应通道信号，实现检测结果的定性和定量分析。
产品名称 | 马蛔虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Parascaris equorum Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3892 |
试剂组成
| 组分 | 规格 | 数量 |
| 马蛔虫扩增液 | 50μL | 1管 |
| 马蛔虫反应液 | 950μL | 1管 |
| 马蛔虫阳性质控品(1×10⁸拷贝/μL) | 50μL | 1管 |
| 马蛔虫阴性质控品(超纯水) | 50μL | 1管 |
| 说明书 | - | 1份 |
注：不同批号试剂盒组分不可交互使用。
适用仪器
兼容ABI、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf等系列荧光定量PCR仪。
自备材料
无DNA/RNA酶的1.5mL离心管
0.2mL PCR反应管
滤芯吸头(10μL,200μL,1000μL)
离心机、振荡混合器
各种规格移液器
商业化DNA提取试剂盒
样品要求
样本类型：粪便、肠道内容物或组织样本
采集规范：避免样本间交叉污染，采集后应及时检测
保存条件：
短期保存：-20℃
长期保存：-70℃（不超过6个月）
运输条件：2-8℃冰袋运输，严禁反复冻融
操作流程
1. 样本处理（样本处理区）
使用商业化试剂盒提取样本DNA
设置对照：阳性对照（10μL阳性对照稀释液+水）、阴性对照（纯水）
2. PCR反应体系配制（试剂准备区）
按每管20μL分装PCR预混液至0.2mL反应管
加入18μL DNA模板（样本或对照品），避免气泡
加样顺序：先阴性对照→样本→阳性对照
3. PCR扩增程序（扩增区）
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 10 sec | 40 |
| 退火延伸 | 60℃ | 30 sec | |
| 荧光采集 | 退火延伸阶段 | FAM通道 | |
4. 结果分析
阈值设定：高于阴性对照最高荧光值
判定标准：
阳性：Ct值≤45且扩增曲线呈典型S型
阴性：无Ct值或Ct值＞45
可疑样本：35<Ct值≤45，建议复检
注意事项
防污染措施：
严格分区操作（试剂准备、样本处理、PCR扩增）
使用专用耗材及实验服
阳性对照单独存放，操作后紫外消毒台面
性能参数
特异性：针对马蛔虫保守基因序列设计，与其他寄生虫或宿主DNA无交叉反应
灵敏度：可检测低至10²拷贝/μL的马蛔虫DNA
本产品仅限科研使用
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