产品特点
高灵敏度与特异性：
引物针对大片吸虫DNA高度保守区设计，避免与其他生物样本交叉反应。
采用新型荧光染料（如EvaGreen），信号强且对PCR抑制小，检测下限可达1×10^2拷贝/μL。
即开即用：
预混优化反应体系（含Hot Start Taq DNA聚合酶），用户仅需提供DNA模板。
质量控制：
提供阳性对照（非活体DNA片段）和阴性对照（DEPC-H2O），便于区分假阴性结果。
应用范围：
适用于科研领域的大片吸虫定性或定量检测，线性范围覆盖5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。
产品名称 | 大片吸虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Fasciola spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3920 |
操作流程
样本DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
标准曲线制备（可选）
标记6管，编号7至2，每管加45 μL稀释液（如DEPC-H2O）。
梯度稀释阳性对照（初始浓度1×10^8拷贝/μL），依次获得10^7~10^2拷贝/μL的标准品，冰上暂存。
反应体系配制
每20μL反应体系包含：
预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、酶）
正向/反向引物（终浓度0.2 μM）
模板DNA 2 μL（阴性对照以水替代）
qPCR扩增程序
预变性：95℃ 2分钟
循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
溶解曲线分析：60~95℃（仅染料法需此步骤）。
注意事项
分区操作：DNA提取、试剂配制、模板添加需在独立区域进行，避免污染。
耗材要求：使用带滤芯枪头及无核酸酶离心管。
数据判读：
阈值循环数（Ct值）≤35且溶解曲线为单一峰，判为阳性；
阴性对照Ct值应为“Undetected”。
仅限科研：不可用于临床诊断。
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关键字： 大片吸虫通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;