产品用途

科研实验,适用于乙型肝炎病毒(HBV)DNA的定性及定量检测。
产品名称 | 乙型肝炎病毒通用型染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Hepatitis B Virus (HBV) Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3941 |

技术原理

基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术,通过特异性引物扩增HBV保守区序列,染料与双链DNA结合后释放荧光信号,实时监测扩增进程,实现病毒载量检测。
产品特点

即开即用:预混反应液含PCR所需酶、dNTPs及优化缓冲体系,仅需加入模板DNA和引物。
高灵敏度:检测下限可达10-100 copies/μL,线性范围覆盖5个数量级(10^1~10^6 copies/μL)。
特异性强:引物针对HBV通用型保守区设计,避免与其他病原体或人源DNA交叉反应。
内控系统:提供阳性对照(HBV质粒标准品)和阴性对照(无模板对照),确保结果可靠性。
适配性广:兼容常见荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Bio-Rad CFX等)。
操作流程

样本准备:提取待测样本DNA(血清/血浆/组织),建议使用柱式核酸提取试剂盒。
反应体系配制(20μL):
预混PCR Master Mix:10μL
引物混合液:2μL
模板DNA:2μL(≤200 ng)
RNase-free水:补至20μL
PCR程序:
预变性:95℃ 5分钟
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光)
熔解曲线分析:60℃~95℃,每0.5℃递增
结果判读
定量分析:通过标准曲线计算样本中HBV DNA拷贝数。
熔解曲线:单一峰值表明扩增特异性良好,杂峰提示引物二聚体或污染。
注意事项

实验需在无菌环境下操作,避免气溶胶污染。
阳性对照与待测样本应分区域处理,防止交叉污染。
若样本Ct值>35,建议重复检测或稀释后复测以排除抑制剂干扰。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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