预期用途

本试剂盒基于SYBR Green I 荧光染料法,用于定量检测人血清或血浆样本中的乙型肝炎病毒(HBV)基因G型DNA,适用于:
HBV G型感染的辅助诊断
抗病毒治疗效果监测
疾病进展评估与预后判断
注:HBV G型为罕见基因型,通常与A型共感染,需结合分型结果综合解读。
产品名称 | 乙型肝炎病毒G型染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Hepatitis B Virus Genotype G Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3942 |

检测原理

核酸提取:磁珠法提取样本中HBV DNA。
PCR扩增:
采用G型特异性引物靶向HBV核心区保守序列。
SYBR Green I 染料实时嵌入双链DNA,荧光信号强度与DNA含量成正比。
定量分析:通过标准曲线计算样本中HBV DNA拷贝数(IU/mL)。
主要组成成分

| 组分 | 规格(96测试) | 储存条件 |
| G型PCR反应液 | 1.2 mL × 2管 | -20℃避光 |
| 酶混合液 | 150 μL × 1管 | -20℃ |
| HBV G型阳性标准品 | 1.0×10⁶ IU/mL × 5管 | -70℃ |
| 阴性对照 | 1 mL × 1管 | -20℃ |
| DNA提取试剂盒 | 96人份 | 室温 |
技术性能

灵敏度:检测下限(LOD)15 IU/mL。
线性范围:1.0×10² ~ 1.0×10⁸ IU/mL(R² ≥ 0.99)。
特异性:
不与其他HBV基因型(A-F, H)交叉反应;
与HCV、HIV、CMV等常见病原体无交叉。
精密度:
批内/批间CV ≤ 5%。
操作步骤

核酸提取:取200 μL血清/血浆,按DNA提取试剂盒说明操作。
配制PCR体系:
| 组分 | 体积(μL) |
| G型PCR反应液 | 15 |
| 酶混合液 | 1 |
| 模板DNA | 4 |
上机扩增:
程序:95℃ 5min → (95℃ 10s → 60℃ 30s) × 45循环 → 熔解曲线分析。
结果判读:
阳性:Ct值 ≤ 38.0,熔解曲线峰值在82±1℃;
可疑:Ct值 >38.0需复测;
定量:根据标准曲线自动计算IU/mL。
注意事项

样本要求:
使用EDTA或枸橼酸钠抗凝血浆,避免肝素干扰;
2~8℃保存不超过72小时,-70℃长期保存。
熔解曲线验证:必须通过熔解峰温度确认产物特异性,排除非特异性扩增。
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