检验原理
采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术,针对葡萄球菌属高度保守基因区域设计特异性引物,通过实时监测扩增过程中的荧光信号,实现核酸的定性与定量分析。
产品名称
葡萄球菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Staphylococcus spp. Universal Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4092
试剂组成
核心组分
葡萄球菌属通用扩增液(含预混酶、dNTPs、缓冲液等);
SYBR Green荧光染料;
阳性对照(已知浓度葡萄球菌属核酸);
阴性对照(无核酸酶水)。
可选附加组件
部分提供RNA提取试剂(需用户自备样品模板)。
操作步骤
样本准备
提取待测样本DNA/RNA,建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系配制(以20μL为例)
| 成分 | 体积(μL) |
| 扩增液 | 10 |
| 模板DNA | 2 |
| 无核酸酶水 | 补至20 |
PCR程序设置
预变性:95℃ 5 min;
扩增循环(40次):95℃ 10 sec → 60℃ 30 sec(采集荧光信号);
熔解曲线分析:60℃~95℃,每0.5℃递增。
结果判读
定量分析
通过标准曲线(阳性对照Ct值-log浓度)计算待测样本浓度。
定性分析
阳性:Ct值≤35,且扩增曲线呈S型;
阴性:Ct值≥40或无扩增;
可疑(35<Ct<40):需重复检测。
注意事项
仅限科研使用,不可用于临床诊断;
避免反复冻融试剂,分装后使用;
操作时需佩戴防护用具,防止交叉污染;
不同引物探针设计可能存在差异,需根据说明书调整实验条件。
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上海博湖生物科技有限公司
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