南非诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒

产品基本信息

规格：50T（50次20μL体系反应）

保存条件：-20℃低温保存，需低温运输

有效期：12个月

适用范围：科研用途

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品RNA模板，操作便捷。

高灵敏度：引物与探针经优化设计，检测限低。

内控对照：提供阳性对照，有效区分假阴性结果。

高特异性：引物基于南非诺卡菌高度保守区设计，避免与其他病原体RNA交叉反应。

稳定可靠：试剂经严格质控，适用于重复性实验。

实验流程

RNA模板制备：建议使用新鲜组织样本，避免反复冻融导致降解。

反应体系配置：

每20μL反应体系包含预混Buffer、引物探针混合物及RNA模板。

阴性/阳性对照需同步设置。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40-45 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（荧光采集）。

数据分析：通过标准曲线计算样本中南非诺卡菌RNA浓度。

注意事项

样本处理：长期冷冻组织需避免反复冻融，建议分装保存。

试剂溶解：若Buffer AL出现沉淀，需室温平衡或37℃预热10分钟，混匀后使用。

电泳要求：禁止使用含SDS的Loading Buffer，以防拖尾现象。

扩增片段：推荐扩增片段≤1 kb以确保效率。

安全防护：实验全程需穿戴实验服及一次性手套。

标准品稀释方法

按梯度稀释原倍标准品（如24μg/ml→12μg/ml→6μg/ml等），每步稀释比例为1:1（150μl标准品+150μl稀释液）。

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