产品概述

本试剂盒采用SYBR Green染料法荧光定量PCR技术,专用于快速、高灵敏度检测星状诺卡菌核酸。试剂盒包含预混反应体系(含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂、缓冲液及PCR增强剂),用户仅需提供模板DNA和特异性引物即可完成扩增反应。适用于科研、临床样本筛查及环境监测等领域。
产品名称 | 星状诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Nocardia asteroides Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4164 |

产品特点

高灵敏度:检测限低至10³拷贝/mL,适用于低浓度样本。
特异性强:引物针对星状诺卡菌保守序列设计,避免交叉反应。
即开即用:预混优化反应体系,简化操作流程。
稳定性高:-20℃保存6个月,性能稳定。
兼容性强:支持多种样本来源(如组织、体液、环境样本)的DNA提取物。
组分清单

(50次反应,20μL/体系)
| 组分名称 | 规格 |
| 2× qPCR Master Mix | 1 mL |
| 星状诺卡菌引物混合液 | 100 μL |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL |
| DEPC-H₂O | 1 mL |
操作步骤

样本DNA制备
使用商业核酸提取试剂盒或酚-氯仿法提取样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系配制(20μL体系)
| 组分 | 体积(μL) |
| 2× qPCR Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 0.8 |
| 模板DNA | 2 |
| DEPC-H₂O | 7.2 |
PCR扩增程序
预变性:95℃, 3分钟;
循环扩增(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(荧光采集);
熔解曲线分析:60℃至95℃,每0.5℃递增,持续5秒/step。
数据分析
阈值设定:以3-15循环的荧光信号基线标准差的10倍为阈值。
Ct值判定:Ct≤35且熔解曲线为单一峰视为阳性。
注意事项

分区操作:建议在样本制备区、PCR反应区分区操作,避免污染。
试剂保存:-20℃避光保存,避免反复冻融。
质量控制:每批实验需包含阴性对照(DEPC-H₂O)和阳性对照。
安全防护:佩戴手套操作,废液按生物危害废弃物处理。
运输与储存
运输条件:低温避光,干冰运输。
储存条件:-20℃保存,有效期6个月。
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关键字: 星状诺卡菌;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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