产品用途

用于科研实验中Cryptosporidium parvum(小隐孢子虫)DNA的定性或定量检测,适用于环境样本、临床样本或其他生物样本的病原体筛查。
产品名称 | 小隐孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cryptosporidium parvum Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4196 |

主要组分

预混PCR Master Mix:含SYBR Green荧光染料、dNTPs、热启动Taq DNA聚合酶及优化缓冲体系。
特异性引物:针对Cryptosporidium parvum高度保守区域设计,确保灵敏性(检测限达100拷贝/反应)和特异性(无交叉反应)。
阳性对照:含靶序列的质粒DNA,用于实验质控。
阴性对照:无核酸酶水,排除污染干扰。
自备试剂与仪器
样本要求:需提供提取的DNA模板(纯度A260/A280建议1.8-2.0)。
适用仪器:
ABI系列(如7500、StepOnePlus)、安捷伦MX3000P/3005P、Roche LightCycler、Bio-Rad CFX、Eppendorf RealPlex等荧光定量PCR仪。
检验原理

基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术,通过检测扩增过程中荧光信号变化,实时定量靶标DNA浓度。线性范围覆盖至少5个数量级,支持绝对定量(需标准曲线)或相对定量分析。
操作步骤

反应体系配制:按20μL/反应混合模板DNA、预混液及引物。
PCR程序设置:
预变性:95℃ 5分钟;
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光);
熔解曲线分析:60℃至95℃,升温速率0.3℃/秒。
数据分析:通过阈值循环数(Ct值)及熔解曲线峰型判定结果。
注意事项

避免反复冻融试剂,分装后使用。
实验需在无菌环境下操作,防止气溶胶污染。
定量分析时需同步运行标准品(需另购或自制)。
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关键字: 小隐孢子虫;染料法荧光定量;PCR试剂盒;