贝氏隐孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发，用于特异性检测贝氏隐孢子虫（Cryptosporidium baileyi）的核酸。适用于科研领域的定性及定量分析，具有高灵敏度和特异性，操作便捷，即开即用。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，无需额外优化反应体系。

高灵敏度：引物针对高度保守区设计，检测限可达10^2拷贝/μL。

内控设计：提供阳性对照（1×10^8拷贝/μL），有效区分假阴性结果。

广谱兼容性：适用于多种样本类型（如粪便、血液、病灶组织等）。

双重应用：支持定性和定量检测，定量线性范围覆盖5个数量级。

包装规格

试剂一：PCR MagicMix 3.0（1 mL，红盖）

试剂二：超纯水（1 mL，亮黄色）

试剂三：引物混合液（100 μL，白盖）

试剂四：阳性对照（50 μL，1×10^8拷贝/μL，黄盖）

说明书：1份

规格：50次/盒（20 μL体系/次）

操作流程

1. 阳性对照稀释（以10^2–10^7拷贝/μL为例）

步骤：

标记6管（7–2号），每管加45 μL专用稀释液。

7号管加入5 μL阳性对照（原液），震荡混匀得10^7拷贝/μL稀释液。

依次梯度稀释至10^2拷贝/μL（6号至2号管）。

注意：操作需在独立区域进行，避免交叉污染。

2. PCR反应体系配制

按20 μL体系混合以下组分：

模板DNA 2 μL

引物混合液 1 μL

PCR MagicMix 10 μL

超纯水补至20 μL

3. 荧光定量PCR程序

预变性：95℃ 5 min

循环阶段（40 cycles）：

变性：95℃ 15 sec

退火/延伸：60℃ 1 min（采集荧光信号）

注意事项

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

污染防控：实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）。

结果判读：Ct值≤35且扩增曲线呈“S”形视为阳性。

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