细胞简介:

人肝窦内皮细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝窦内皮细胞(SEC)是肝脏内所占比例高的非实质细胞,位于肝窦腔与肝细胞之间,具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时,肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失,内皮下基膜形成,产生类似于连续型毛细血管的结构,这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起,其过程极复杂,在多种肝病的发病前期阶段均有出现,近年来受到广泛关注。
产品名称 | 人肝窦内皮细胞 | 组织来源 | 肝脏组织 |
英文名称 | Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4508 | 生长特性 | 贴壁 |

产品信息:

产品名称 人肝窦内皮细胞
组织来源 肝脏组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的人肝窦内皮采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法,并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人肝窦内皮经CD31、CD14免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人肝窦内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤:

1. 细胞复苏
运输与接收:细胞以液氮冻存形式运输,收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶,置于超净台内无菌操作。
复苏操作:将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态,显微镜下观察细胞形态和密度,记录初始状态(建议40x、100x、200x各拍一张照片)。
2. 细胞传代
传代时机:当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤:
弃去旧培养基,用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(1-2 mL),37℃孵育1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心(1000 RPM,5分钟),弃上清,用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代(如T25瓶分至两个T25瓶),补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率:每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液:使用无血清冻存液。
冻存步骤:细胞传代后,用胰蛋白酶消化并离心,重悬于冻存液,缓慢降温至-80℃,最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品:
小鼠腓肠肌细胞 Mouse Gastrocnemius Muscle Cells | AF750标记的FLIP抗体 |
TU-138人喉癌细胞 | 体液硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒 |
通用型N-乙酰转移酶(NAT)活性高效液相层析法(HPLC)定量检测试剂盒 | 细胞腺苷酸环化酶(Adenylate Cyclase)活性荧光定量检测试剂盒 |
GSK-3ALPHA蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 冰冻切片组织αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
通用型半胱(cysteine)含量比色法定量检测试剂盒 | α-L岩藻糖苷酶抗体 |
组织EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性检测试剂盒 | KB抑制蛋白激酶β抗体 |
间隙连接蛋白31.1/GJB5抗体 | EMB蛋白抗体 |
谷胱甘肽过氧化酶2抗体 | 伪绵马素Pseudoaspidin |
转录因子HES6抗体 | 蔓荆呋喃50656-65-0 |
胎球蛋白B/Fetuin β抗体 | 5'-甲氧基松脂素Medioresinol |
磷酸化KLF5抗体 | 人肝窦内皮细胞去甲异波尔定23599-69-1 |
冰冻切片基质金属(MMP)原位明胶酶谱法(in situ zymography)荧光染色试剂盒 | 兔支气管成纤维细胞 Rabbit Bronchial Fibroblast Cells |
粪便DNA分离试剂盒 | LP-1细胞 |
产品注意事项:
无菌操作是生命线:所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行,使用专用试剂和耗材,防止交叉污染。
消化是关键步骤:
控制时间:使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时,严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止,避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择:部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶,也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的,可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子:
基础培养基:推荐使用专用培养基(如EGM-2 MV BulletKit)。若使用DMEM/F12等基础培养基,需补充10-20%胎牛血清(FBS)及抗生素(如青霉素/链霉素)。
生长因子:为促进生长,可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养(一瓶用原装完全培养基,一瓶用自配培养基)。
细胞密度与传代:
最佳传代密度:建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代,避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理:若细胞生长不均,成岛状分布,可将细胞消化后重新打散,加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理:
定期检查:定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理:若发现污染,需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗,但严重污染时建议弃置细胞。
关键字: 人肝窦;内皮细胞;
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