检验原理
采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对Bt基因保守区域设计特异性引物及探针。通过实时监测扩增过程中的荧光信号（FAM通道），实现转基因成分的定性与定量分析。
产品名称
转基因功能基因Bt探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Transgenic Functional Gene Bt Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4833
适用领域
农业转基因检测（如Bt棉花、Bt玉米）、食品安全监测、环境微生物研究。
试剂组成
核心组分
Bt扩增液（25μL×1管）
Bt反应液（975μL×1管）
阳性质控品（人工合成DNA片段，50μL×1管）
阴性质控品（50μL×1管）
注意事项
不同批号试剂不可混用；
避免反复冻融（≤7次）。
样品要求
样本类型
转基因作物组织（叶片、种子）、食品加工物（玉米粉、棉籽油残渣）、环境样本。
保存与运输
短期保存：-20℃；长期保存：-70℃（≤6个月）；
运输需使用2~8℃冰袋，禁止反复冻融。
操作步骤
DNA提取
推荐使用商品化提取试剂盒（如Hypure病毒基因组DNA提取试剂盒）。
反应体系配制
每反应体系20μL（含19.5μL反应液+0.5μL扩增液）；
加样：5μL模板DNA/质控品。
PCR扩增程序
预变性：95℃ 3min；
40循环：95℃ 15s → 55℃ 30s（荧光采集）。
结果判读
阳性：Ct≤35.0且扩增曲线指数期明显；
可疑：35.0<Ct≤38.0需复测；
阴性：无Ct值或无明显曲线。
质控标准
阳性质控Ct≤30，阴性质控无扩增。
性能参数
灵敏度：最低检测限1×10³ copies/mL；
特异性：针对Bt基因保守区域，无交叉反应；
精密度：批内/批间CV≤3%。
严格分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区）；
使用无核酸酶耗材（吸头、离心管）；
避免荧光探针长时间光照；
检测结果需结合其他方法验证，不可单独用于临床诊断。
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