转基因元件探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 转基因元件探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Transgenic Element Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5310 |
产品概述
本试剂盒采用实时荧光定量PCR技术(TaqMan探针法),针对转基因玉米品系NK603的品系特异性边界序列设计引物与探针,通过检测外源基因插入位点的独特核酸序列实现高特异性鉴定。适用于食品、饲料等样本中NK603成分的定性检测,检出限为0.1%。

检测原理
靶标序列:检测外源DNA与玉米基因组连接处的特异性边界序列(非启动子或通用基因),确保仅NK603品系呈阳性。
探针设计:
FAM标记探针:结合NK603特异性序列。
内标探针(如VIC/HEX标记):检测玉米内源基因(如Zein),验证DNA提取质量及PCR有效性,避免假阴性。
多重PCR:单反应管同步检测目标序列与内标,提升效率。
试剂盒组成
PCR反应液(含dNTPs、缓冲液等)
热启动Taq酶
NK603特异性引物探针混合液
阳性对照(含NK603靶序列的DNA)
阴性对照(非转基因玉米DNA)
内标系统试剂
技术参数
检测范围:2×10³~1×10⁸ copies/mL
保存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
适用仪器:ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P等主流荧光PCR仪。
操作流程
样本制备:按《GB/T 19495.3-2004》提取样本DNA,避免交叉污染。
PCR体系配制:
反应液 + 酶 + 引物探针组 + 模板DNA(5μL)。
扩增程序:
预变性:95℃ 10分钟
45循环:95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(荧光采集)
结果判读:
阳性:FAM通道Ct≤40,呈S型曲线。
阴性:无扩增曲线或Ct≥45。
可疑值(40<Ct<45):需重复检测确认。
注意事项
分区操作:严格分离样本制备区、模板添加区、扩增区,防止气溶胶污染。
质量控制:
内标通道必须有效(VIC阳性),否则实验无效。
阳性对照需呈S型曲线,阴性对照无扩增。
耗材要求:使用灭菌吸头、离心管,避免RNA酶污染。
应用范围
科研用途:转基因作物鉴定、食品安全监测。
不适用于:临床诊断或医疗用途。
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关键字: 转基因元件;探针法荧光定量;PCR试剂盒;
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