检验原理
采用TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，针对鲤浮肿病毒（CEV）基因组保守区域设计特异性引物及荧光探针（FAM标记），通过荧光信号扩增曲线实现对病毒核酸的定性检测。
产品名称 | 鲤浮肿病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Carp Edema Virus (CEV) Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4834 |
试剂盒组分
| 组分 | 25T/盒规格 | 50T/盒规格 |
| 反应液 | 500μL×1管 | 500μL×2管 |
| 酶液 | 25μL×1管 | 50μL×1管 |
| 阳性质控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |
| 阴性质控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |
注意：不同批号组分不可混用。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500
安捷伦 MX3000P/3005P
LightCycler®（罗氏）、Bio-Rad CFX、Eppendorf Mastercycler®等。
操作步骤
样本处理
核酸提取：推荐使用磁珠法或离心柱法提取样本RNA/DNA。
试剂配制（按N=样本数+2质控计算）
每反应体系：19μL反应液 + 1μL酶液，分装至PCR管。
加样
加入5μL模板核酸（样本/阴性质控/阳性质控）至反应管，离心混匀。
PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 荧光采集 |
| 预变性 | 95℃ | 2min | 1 | 否 |
| 扩增 | 95℃ | 15sec | 45 | 否 |
| | 60℃ | 30sec | | 是（FAM）|
结果判读
阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长。
阴性：无Ct值或扩增曲线平直。
可疑：40<Ct≤45，需复测确认。
质控标准
阴性质控：无Ct值或扩增信号。
阳性质控：Ct值≤32且曲线指数期明显。
局限性及注意事项
局限性
检测结果受样本质量、运输条件及操作规范性影响。
病毒变异可能导致假阴性。
操作要求
分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区分离）。
使用一次性耗材，避免交叉污染。
实验后需用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面。
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关键字： 鲤浮肿病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;