预期用途
本试剂盒适用于血清、组织（心、肝、脾、肺、肾、脑）及全血样本中新型布尼亚病毒RNA的特异性检测，用于临床辅助诊断或科研用途。检测结果需结合临床症状及其他实验室指标综合判断，不可作为唯一诊断依据。
产品名称 | 新型布尼亚病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus (SFTSV) Probe-based Fluorescent Quantitative RT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4846 |
检测原理
采用一步法荧光定量RT-PCR技术，针对新型布尼亚病毒保守基因区域设计特异性引物及TaqMan探针。通过逆转录和扩增反应，实时监测荧光信号，实现对病毒RNA的定性检测。
试剂组成
（50T/盒规格）
反应液：500μL×2管（含引物、探针、dNTPs、缓冲体系）
酶混合液：50μL×1管（逆转录酶、Taq DNA聚合酶）
阳性质控品：50μL×1管（含灭活病毒RNA）
阴性质控品：250μL×1管（无RNA酶水）
注意事项：
不同批号试剂禁止混用。
各组分需按说明书要求保存，避免反复冻融（≤5次）。
储存条件与有效期
储存温度：-20℃±5℃，避光保存。
有效期：12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500/QuantStudio系列
安捷伦MX3000P/3005P
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf Mastercycler ep realplex
样本要求
组织样本：取心、肝、脾等组织1g，匀浆后离心取上清。
全血样本：采集2mL，分离血清后取100μL。
保存与运输：短期-20℃保存，长期需-70℃；运输使用2~8℃冰袋，避免反复冻融。
操作步骤
核酸提取
推荐使用磁珠法或离心柱法提取RNA，按提取试剂说明书操作。
反应体系配制（单反应25μL）
| 组分 | 体积 |
| 反应液 | 20μL |
| 酶液 | 1μL |
| 模板RNA | 4μL |
PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 42℃ | 20 min | 1 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | 1 |
| 扩增 | 94℃ | 15 sec | 40 |
| | 55℃ | 30 sec | |
结果判读
阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈指数增长。
可疑：35<Ct值≤38，建议复测。
阴性：Ct值>38或无扩增曲线。
质控要求：阴性质控品无Ct值，阳性质控品Ct值≤32。
局限性
样本质量、运输条件或操作误差可能影响结果准确性。
病毒变异可能导致假阴性。
交叉污染风险需严格分区操作。
注意事项
实验需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。
使用一次性耗材，分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区分离）。
废液及耗材需按生物危害废弃物处理（10%次氯酸或75%乙醇消毒）。
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