预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，专用于检测人GAPDH基因的核酸。GAPDH作为糖酵解关键酶，广泛表达于各类组织，是内参基因的常用选择。
产品名称 | 人GAPDH基因探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Human GAPDH Gene Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4854 |
产品特点
高灵敏度与特异性：针对人GAPDH基因保守区域设计的引物及探针，避免交叉反应。
即开即用：仅需提供DNA模板，操作便捷。
质控完善：含阳性质控品（明确Ct值范围）和阴性质控品，辅助结果判读。
闭管操作：降低气溶胶污染风险。
适用范围：仅限科研用途，不可用于临床诊断。
检验原理
通过TaqMan探针与目标DNA结合，在扩增过程中释放荧光信号，实时监测荧光强度变化，实现定量分析（绝对定量或相对定量）。
试剂组成
| 组分 | 规格 |
| GAPDH基因扩增液 | 25μL×1管 |
| GAPDH基因反应液 | 975μL×1管 |
| 阳性质控品 | 50μL×1管 |
| 阴性质控品 | 50μL×1管 |
| 说明书 | 1份 |
储存与运输
储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。
有效期：12个月。
运输：冰袋（2~8℃）密封运输。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI系列、Bio-Rad CFX、Roche LightCycler等）。
自备耗材
无核酸酶离心管（0.2mL PCR管、1.5mL离心管）、滤芯吸头（10/200/1000μL）。
离心机、涡旋振荡器、移液器。
样本要求
样本类型：组织、细胞、血液等（需提取DNA）。
保存条件：短期-20℃，长期-70℃（避免反复冻融）。
运输：2~8℃冰袋运送。
操作步骤
DNA提取：推荐使用柱式法提取试剂盒，提取后-15℃暂存。
反应体系配制（20μL/反应）：
反应液：19.5μL
扩增液：0.5μL
模板DNA：5μL
PCR扩增程序（以ABI仪器为例）：
预变性：95℃ 3min
循环：95℃ 15s → 60℃ 30s（40循环，采集FAM通道信号）
结果分析
阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。
阴性判定：无Ct值或Ct值>38。
注意事项
分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免污染。
不同批号试剂不可混用。
探针避光保存，避免反复冻融。
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