对虾杆状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Shrimp Baculovirus Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4620
产品特点
高灵敏度:优化的引物和探针设计,检测限低至10^2拷贝/μL。
特异性强:靶向对虾杆状病毒保守基因区域,无交叉反应。
快速便捷:即开即用,仅需提供样品RNA模板。
质控完善:含阳性对照(非活病毒DNA片段),避免假阴性干扰。
适用范围:科研用途,适用于食品、血液、粪便及病灶样本的病原检测。
试剂盒组成
荧光PCR反应液:含染料法荧光探针、dNTPs、缓冲体系。
酶混合液:热启动Taq DNA聚合酶。
阳性对照:冻干DNA片段(10^8拷贝/μL,需稀释使用)。
阴性对照:无核酸酶水。
说明书:1份。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪,包括:
ABI 7500
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler
Eppendorf Mastercycler ep realplex
操作步骤
1. 样本处理
核酸提取:推荐使用磁珠法或离心柱法提取RNA,避免降解。
2. 试剂配制(20μL/反应)
| 组分 | 体积/反应 |
| 反应液 | 18μL |
| 酶液 | 1μL |
| 模板RNA | 1μL |
3. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃, 3min | 1 |
| 变性 | 95℃, 15s | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃, 30s | |
4. 数据分析
阈值设定:以阴性对照荧光信号为基线。
阳性判定:Ct值≤35且扩增曲线呈S型。
注意事项
实验分区操作(试剂配制区、样本处理区、扩增区),避免污染。
阳性对照需独立稀释,防止污染其他组分。
废弃物料需经高压灭菌处理。
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