东方泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒

东方泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测东方泰勒虫核酸，适用于科研领域（不可用于临床诊断）。通过特异性引物和荧光信号放大，实现对目标基因的定性及定量分析，灵敏度可达几百拷贝/反应。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高特异性：针对东方泰勒虫保守序列设计引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测下限为数百拷贝/反应。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

稳定可靠：50次反应体系（20μL/次），批内重复性优异。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | -20℃避光 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | -20℃避光 |

| 东方泰勒虫PCR引物混合液 | 100 μL（白盖） | -20℃避光 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | -20℃避光 |

| 使用手册 | 1份 | 常温 |

注意事项：

不同批号组分不可混用。

反复冻融次数不超过7次。

储存与运输

储存条件：-20℃±5℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：低温运输（冰袋或干冰）。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括但不限于：

ABI 系列（如7500、StepOnePlus）

Bio-Rad（CFX96）

Roche LightCycler

Eppendorf Mastercycler ep realplex

使用方法

阳性对照稀释（以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例）

标记6管（7~2号），每管加45 μL稀释液。

7号管加入5 μL阳性原液（1×10⁸拷贝/μL），涡旋混匀，得10⁷拷贝/μL梯度。

依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL），每次更换枪头。

样品DNA制备

按常规方法提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

PCR反应体系（20μL）

| 组分 | 体积 |

| 2×qPCR MagicMix | 10 μL |

| 引物混合液 | 2 μL |

| 模板DNA/阳性对照 | 2 μL |

| 荧光PCR稀释液 | 6 μL |

循环条件：

预变性：95℃ 3分钟

扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40循环）

结果判读

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型。

阴性：无Ct值或Ct值＞38。

注意事项

操作需分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免污染。

阳性对照稀释需独立操作，严禁接触其他组分。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

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