瑟氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒

瑟氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

科研用途，适用于牛红细胞及淋巴细胞中瑟氏泰勒虫DNA的定性与定量检测。

技术参数

灵敏度：最低检测限为100拷贝/反应。

特异性：针对瑟氏泰勒虫保守序列设计，无交叉反应。

线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。

反应组分：预混优化引物、SYBR Green荧光染料、酶混合物及阳性对照。

检测方法：染料法荧光定量PCR（无需探针，依赖双链DNA结合荧光信号）。

操作流程

1. DNA提取（样本制备区）

使用兼容的核酸提取试剂盒提取样本DNA（如牛血液或淋巴细胞来源）。

2. 标准曲线制备（独立区域操作）

标记离心管（7~2号），依次稀释阳性对照（初始浓度1×10^8拷贝/μL）至5个梯度（10^7~10^3拷贝/μL），每步使用带滤芯枪头避免污染。

3. PCR反应体系配置（PCR准备区）

按20μL体系混合：模板DNA（2μL）、预混试剂（含引物、染料、酶）、DEPC水。

阳性对照与待测样本同步检测。

4. 扩增程序（仪器区）

按标准qPCR程序运行：

预变性：95℃ 2分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

熔解曲线分析：60℃~95℃（验证扩增特异性）。

注意事项

实验环境：需分区操作（样本制备、PCR配置、扩增），避免气溶胶污染。

质量控制：

阴性对照（无模板）需无信号。

阳性对照Ct值应在预期范围内。

储存与运输：-20℃保存，干冰运输。

适用性：仅限科研，不用于临床诊断。

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