人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3探针法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Human Glypican-3 Probe-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4636 |
产品概述
人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3, GPC3）是一种膜性硫酸乙酰肝素糖蛋白，在细胞生长发育中起重要调控作用，且在不同恶性肿瘤中表达差异显著，是肿瘤发生的重要指标之一。本试剂盒以探针法荧光定量RT-PCR技术为核心，基于GPC3高度保守的基因序列设计引物和探针，可实现对血液、组织等样本中靶标核酸的快速定性与定量检测，适用于肿瘤诊断、疗效监测及相关科研工作。
产品用途
本试剂盒采用探针法荧光定量RT-PCR技术，特异性检测人样本中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）的mRNA表达水平，适用于科研实验，不可用于临床诊断。
试剂盒组成
RT-PCR反应液：包含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs等。
探针混合液：针对GPC3基因的特异性荧光标记探针及引物。
阳性对照：含GPC3靶序列的质粒或标准品。
阴性对照：无核酸酶水或非靶标序列。
其他辅助试剂：如RNase抑制剂、缓冲液等。
操作步骤
RNA提取：使用配套或兼容的RNA提取试剂盒处理样本。
逆转录（RT）：将RNA模板逆转录为cDNA。
荧光定量PCR：
配制反应体系，加入探针混合液及cDNA模板。
按仪器要求设置扩增程序（通常为：95℃预变性，40-45个循环的95℃变性、60℃退火/延伸）。
数据分析：通过标准曲线法或ΔΔCt法计算目标基因表达量。
注意事项
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
样本要求：RNA需完整无降解（A260/A280比值1.8-2.0）。
实验环境：需在无核酸污染区域操作，建议使用UDG酶防污染。
技术参数
检测限：可检测低至10拷贝/μL的靶标。
线性范围：10^1–10^8拷贝/μL。
特异性：仅对人GPC3基因无交叉反应。
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