人疱疹病毒5型(human herpesvirus5,HHV-5) 原人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 人疱疹病毒5型(human herpesvirus5,HHV-5) 原人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Human Herpesvirus 5 (HHV-5) / Human Cytomegalovirus (HCMV) Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4638 |
检验原理
本试剂盒采用TaqMan探针法荧光定量PCR技术,针对HHV-5/HCMV基因组高度保守区域设计特异性引物及探针。在PCR扩增过程中,探针与靶序列结合后被Taq酶切割,释放荧光信号,通过实时监测荧光强度实现病毒核酸的定性及定量分析。
试剂组成
扩增液:含PCR反应所需缓冲成分。
反应液:含引物、探针、dNTPs等。
阳性质控品:已知浓度的HHV-5/HCMV核酸片段。
阴性质控品:无核酸酶水或阴性样本基质。
说明书:详细操作流程及注意事项。
储存条件及有效期
储存条件:-20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(建议冻融次数≤7次)。
有效期:12个月(以包装标注为准)。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪,包括:
ABI 7500/QuantStudio系列
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler
其他支持FAM/HEX通道的仪器。
操作步骤
样本处理:采集临床样本(如血液、尿液、呼吸道分泌物),提取核酸。
反应体系配制:按比例混合试剂组分与样本DNA。
PCR扩增:按预设程序运行(通常包括预变性、扩增循环、荧光信号采集)。
结果分析:通过标准曲线计算病毒载量(定量检测)或阈值循环数(Ct值)判断阴阳性(定性检测)。
性能参数
灵敏度:可检测低至10-100拷贝/μL的病毒核酸。
特异性:不与EBV、HSV等其他疱疹病毒交叉反应。
线性范围:10^1~10^7拷贝/μL(需通过标准品验证)。
注意事项
防污染措施:实验分区操作(样本处理区、PCR配制区、扩增区),使用滤芯吸头。
质控要求:每批次实验需包含阴/阳性质控品。
临床解释:阳性结果需结合临床表现及其他检测综合判断。
应用场景
临床诊断:HCMV感染筛查、移植后病毒监测、新生儿先天性感染评估。
科研领域:病毒载量分析、药物疗效评价。
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