产品基本信息
包装规格：50T/盒
检测方法：实时荧光定量PCR（探针法，FAM通道）
适用样本：猪组织、血清、全血等临床样本中PCV-2 DNA的检测。
产品名称 | 猪圆环病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Porcine Circovirus Type 2 (PCV2) Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4892 |
主要组成成分
PCR反应液：含引物、探针、dNTPs及缓冲体系。
酶混合液：含热启动Taq DNA聚合酶、UNG酶（防污染）。
阳性对照：PCV-2特异性基因片段。
阴性对照：无核酸酶水。
储存及运输条件
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（有效期12个月）。
运输条件：低温（冰袋或干冰）运输。
适用仪器
支持多通道荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500/QuantStudio系列
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler 480
杭州博日LineGene系列等。
操作步骤
1. 试剂准备
试剂解冻后涡旋混匀，瞬时离心分装（20 μL/反应管）。
反应体系（25 μL）：PCR反应液20 μL + 模板DNA 5 μL。
2. 加样与扩增
循环程序：
预变性：95℃ 3 min（1循环）；
扩增：95℃ 5 s → 58℃ 40 s（40循环，于58℃采集荧光信号）。
3. 结果判读
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型。
可疑：Ct值35~38，需复测确认。
阴性：Ct值＞38或无扩增曲线。
注意事项
分区操作：严格区分试剂准备区、样本处理区、扩增区，避免交叉污染。
防RNA降解：样本处理需在0-4℃下进行，使用无核酶耗材。
质控要求：每批次实验需包含阴/阳性对照。
仪器设置：ABI仪器需关闭ROX校正，淬灭基团选择“None”。
局限性
检测灵敏度受样本质量影响，低病毒载量（＜10^2 copies/μL）可能导致假阴性。
阳性结果建议结合临床症状或其他方法（如测序）进一步验证。
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关键字： 猪圆环病毒2型;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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