产品基本信息
用途：科研专用（定性/定量检测紫苏子DNA）
规格：50次/盒（20μL体系/次）
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月
运输要求：低温（2~8℃）冰袋运输，避免反复冻融。
产品名称 | 紫苏子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Perilla frutescens (seed) Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4894 |
试剂盒组分
| 成分 | 规格 | 功能 |
| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500μL | 提供反应缓冲环境 |
| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 50μL | 含Taq酶及逆转录酶 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL | 标准品稀释及样品制备 |
| PCR引物-探针干粉 | 50T | 特异性识别紫苏子DNA |
| PCR阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50μL | 标准曲线建立及质控 |
检测原理
基于实时荧光定量PCR技术，通过5'核酸外切酶活性水解探针，释放荧光信号（FAM通道检测），实现对靶DNA的定量分析。探针3'端淬灭基团（NFQ）确保高特异性，避免非特异性扩增。
操作步骤
1. 标准曲线制备
按10倍梯度稀释阳性对照（10^7~10^1拷贝/μL），独立操作避免污染。
标记离心管（6~1号），依次加入稀释液及模板，涡旋混匀后冰上保存。
2. 样品DNA提取
建议设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC）。
兼容市售DNA提取试剂盒，纯化后DNA需避免降解。
3. qPCR反应设置
体系：20μL（含2μL模板DNA）
程序：
逆转录：50℃ 10min
预变性：95℃ 10min
扩增（40循环）：95℃ 15sec → 60℃ 60sec（采集荧光）
4. 数据分析
定量：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，推算样品浓度。
定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；临界值（39~40）需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，防止交叉污染。
质控要求：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤39且呈典型扩增曲线。
防污染措施：使用带滤芯枪头，实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。
局限性：
基因突变或提取效率差异可能导致假阴性；
运输保存不当或操作误差可影响检测准确性。
检测局限性声明
本结果需结合其他临床或实验数据综合判断，不可作为唯一诊断依据。
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关键字： 紫苏子;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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