产品基本信息

规格:50次/20μL反应体系
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。阳性对照需单独存放,防止污染。
用途:专用于泽兰(Lycopi)的核酸定性检测,仅限科研使用,不可用于临床诊断。
产品名称 | 泽兰探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Eupatorium japonicum Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4912 |

产品特点

高特异性:针对泽兰保守序列设计探针及引物,无交叉反应。
高灵敏度:检测限达几百拷贝/反应。
便捷性:即开即用,用户仅需提供DNA模板或样本(如组织、血液、粪便等)。
防污染设计:一管式荧光定量PCR,减少操作污染风险。
质量控制:含阳性对照(1×10^8拷贝/μL)和阴性对照,确保结果可靠性。
样本处理与DNA提取
适用样本类型:
组织匀浆:生理盐水捣碎后离心取上清。
血液/血浆:EDTA或肝素抗凝,离心分离后取上清。
粪便:生理盐水悬浮后离心,沉淀重悬于DNA抽提液。
细胞培养物:离心收集后直接裂解。
DNA提取方法:
试剂盒配套DNA抽提液(粗提法):100℃裂解10分钟,离心取上清。
可选商业化柱提法,提高纯度。
操作步骤

1. 阳性对照稀释(以10^2–10^7拷贝/μL为例)
按10倍梯度稀释阳性对照,独立操作避免污染。
2. PCR反应体系(以40μL为例)
| 成分 | 体积(μL) |
| PCR MagicMix 3.0 | 20 |
| 引物混合液 | 2 |
| 模板DNA/阳性对照 | 18 |
3. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| 35循环(变性) | 95℃ | 30 sec |
| (退火) | 55℃ | 30 sec |
| (延伸) | 72℃ | 40 sec |
| 终延伸 | 72℃ | 7 min |
4. 结果分析
荧光定量PCR:直接读取Ct值,标准曲线定量。
电泳检测:阳性对照需出现551bp条带,阴性无扩增。
注意事项

分区操作:样本处理、PCR配制、扩增需在不同区域进行。
避免污染:使用带滤芯枪头,定期更换手套。
重复验证:若样本未扩增,可稀释后复检以排除抑制剂干扰。
失效判断:阳性对照无信号或阴性对照出现扩增时,实验无效。
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关键字: 泽兰;探针法;PCR鉴定试剂盒;