产品概述
本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专为银柴胡（Radix stellariae）的快速、高特异性鉴定设计。通过实时荧光信号检测，实现对目标DNA的精准定量与定性分析，适用于科研、中药材鉴定及质量控制等领域。
产品信息
规格：50次反应（20μL/反应）
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输条件：低温干冰运输。
产品名称 | 银柴胡探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Stellariae Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4923 |
技术原理
基于TaqMan探针技术，通过特异性引物与荧光标记探针结合目标DNA序列，在扩增过程中释放荧光信号，实时监测PCR进程。探针法具有高灵敏度（可检测低至10³拷贝/μL的模板）和强特异性，避免非目标序列交叉反应。
试剂盒组分
| 成分 | 规格 | 功能 |
| 探针法qPCR缓冲液 | 500μL | 含dNTPs、Mg²⁺及优化缓冲体系 |
| Taq DNA聚合酶混合液 | 100μL | 高保真酶预混液 |
| 银柴胡特异性引物混合液 | 100μL | 靶向保守基因区域 |
| 荧光探针（FAM标记） | 50μL | 信号指示 |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL | 标准曲线制备 |
| 核酸释放剂（试用装） | 1mL | 免提取直接裂解样本 |
| 超纯水 | 1mL | 反应体系稀释 |
实验步骤
1. 样本准备
DNA提取：推荐使用柱式提取法或试剂盒配套核酸释放剂（直接裂解后离心取上清）。
阳性对照稀释：按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL）制备标准曲线。
2. PCR反应体系配制（20μL）
| 组分 | 体积 |
| qPCR缓冲液 | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL |
| 引物混合液 | 2μL |
| 探针 | 1μL |
| DNA模板 | 5μL |
3. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min | 1 |
| 预变性 | 94℃ | 10 min | 1 |
| 扩增 | 94℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | 40 |
4. 数据分析
定量分析：以Ct值为纵轴，标准品log值为横轴绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性分析：Ct值≤35判为阳性，阴性对照应无扩增。
注意事项
样本要求：避免使用降解DNA/RNA，液氮或-80℃保存样本。
污染防控：分装试剂，操作区与扩增区物理隔离。
重复性建议：定量实验需≥3次技术重复。
适用范围：仅限科研，不适用于临床诊断。
性能参数
特异性：经40种近缘菌株验证，无假阳性。
灵敏度：最低检测限10³拷贝/μL。
重现性：批内/批间变异系数＜5%。
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关键字： 银柴胡;探针法;PCR鉴定试剂盒;